我国西南地区免疫接种后儿童乙肝隐匿性感染的研究

摘要

目的：调查我国西南地区父亲和/或母亲为乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）阳性的HBsAg阴性儿童乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）疫苗接种后乙型肝炎病毒隐匿性感染（Occult Hepatitis B Virus Infection，OBI）的发生率，进行基因变异分析并探讨OBI发生的相关因素，为免疫接种后儿童OBI的流行病学研究奠定基础。
　　方法：采集由父亲和/或母亲为HBsAg阳性的HBsAg阴性且接受过乙肝疫苗免疫的儿童血清标本211份。血清学检测由商品化化学发光法（chemiluminescent microparticle immunoassay，CMIA）试剂盒完成。排除年龄小于8m或乙肝疫苗全程免疫接种记录不清的儿童，针对HBV基因组Surface区、Pre-S区、Core/pre-core区及X区利用巢式PCR（nested PCR）检测血清中的HBV DNA，扩增产物纯化后测序并进行基因变异分析，2个或者2个以上区阳性的样本为 OBI阳性。进一步利用荧光定量 PCR（Real-time PCR）进行HBV DNA定量，同时收集了患儿出生史、喂养史等临床资料，分析OBI在该人群中的感染流行及相关因素。
　　结果：共有186名患儿最终纳入本研究。我国西南地区父亲和/或母亲HBsAg阳性的HBsAg阴性儿童乙肝疫苗免疫接种后OBI的发生率为4.3％（8/186）。在8名OBI的患儿中，6名患儿的父亲为HBV感染者，2名患儿的母亲为HBV感染者。通过标准株比对，基因进化树及NCBI分型工具分析发现8例患儿中2例为C基因型，其中1例血清型adrq-，另1例血清型未知。3例B基因型及3例B、C基因型共同感染均为血清型adw2。2例被发现存在抗原决定簇‘a’的逃逸突变且其中P77 HBV DNA水平与显性感染相当，因此被认为是“假OBI”。另发现出位于主要亲水区（major hydrophilic region，MHR）的多个突变。注射乙肝免疫球蛋白（hepatitis B immune globulin，HBIG）不会降低OBI的发生率。母乳喂养及顺产并非OBI的危险因素，母乳喂养可能促进保护性抗体的产生。OBI患儿血清谷丙转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）及谷草转氨酶（aspartate transaminase，AST）水平未见明显异常。
　　结论：OBI存在于父亲和/或母亲HBsAg阳性的乙肝疫苗免疫接种后儿童中。HBV S区的突变可能是导致OBI产生的原因。父亲为HBV感染者的孩子存在OBI的情况在本研究中多有发现，应重视父亲为HBV感染者的情况。喂养方式及生产方式对OBI的发生率并无影响。总体而言乙肝疫苗免疫接种效果较好，但对免疫接种后儿童HBV感染以及OBI的筛查仍应给予足够的重视，特别是对父母为HBV感染者的儿童OBI的筛查。

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前言

1 材料与方法

1.1 主要实验材料

1.2 主要实验试剂及仪器

1.3 实验方法

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 巢式PCR敏感性检测

2.2 乙肝隐匿性感染在免疫接种后儿童中的流行情况

2.3 乙肝隐匿性感染发生于免疫接种后儿童中的相关因素

3 讨论

3.1 我国西南地区免疫接种后儿童乙肝隐匿性感染的情况

3.2 乙肝隐匿性感染检测方法的建立

3.3 基因变异对隐匿性感染的影响

3.4 免疫接种后儿童乙肝隐匿性感染发生的相关因素

3.5 本研究的不足与局限

4 结论

参考文献

综述:免疫接种后儿童乙肝隐匿性感染的研究进展

致谢

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