不同压力下高压氧预处理对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用

摘要

目的：用改进的Zea-Longa法建立大鼠大脑中动脉阻断缺血-再灌注模型(MCAO)，观察大鼠脑缺血-再灌注24小时后神经行为学、脑梗塞体积、缺血半暗带氧化应激反应水平和缺血半暗带组织神经元凋亡的变化，给予安全范围内不同压力高压氧(HBO)预处理后，观察其对上述指标的影响，并探讨HBO预处理对脑缺血组织保护作用的可能机制。
　　 方法：48只WISTAR大鼠，体重250-300g，雌雄各半，随机分为3组：假手术组(n=8)；对照组：MCAO组(n=8)；实验组：HBO-PC+MCAO组(n=32)。实验组再按不同的HBO预处理压力分为1.5 ATA(0.15MPa)、2.0ATA(0.20MPa)、2.5ATA(0.25MPa)和3.0ATA(0.30MPa)4个亚组，每组8只。按不同预处理压力，每次吸氧1 h、隔天1次、共5次10天连续完成。最后一次HBO预处理后24h根据改进的Zea-Longa线栓法制作MCAO-再灌注损伤模型，模型成功的标志为大鼠手术麻醉清醒后Zea-Longa5分制评分＞2分，评分＜2分者剔除并立刻补充。缺血2小时再灌注24h后取大脑皮层缺血半暗带组织进行以下检测：(1)采用Zea-Longa5分制评定大鼠神经功能缺损情况和TTC染色法测量脑梗塞体积。(2)测定脂质过氧化物产物丙二醛(MDA)含量、同时测总超氧化物歧化酶(总SOD)和过氧化氢酶(CAT)等抗氧化酶的活力。(2)用TUNEL法和免疫组织化学法检测大鼠脑皮层缺血半暗带神经细胞凋亡水平和凋亡促进酶Caspase-3及凋亡抑制蛋白bcl-2的表达水平。假手术组和MCAO组不进行HBO或常压氧治疗，10d后处理同实验组。
　　 结果：与对照组比较(1)各实验组动物行为改善，脑梗塞灶体积缩小。(2)各实验组MDA含量均不同程度下降，总SOD和CAT水平均不同程度的增高。(3)各实验组脑缺血半暗带凋亡细胞数和Caspase-3阳性细胞数不同程度降低，bcl-2表达不同水平增高，与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。而在2.0ATA和2.5ATA压力条件下相比较1.5ATA和3.0ATA上述检测指标差异亦有显著性(P＜0.05)；并且2.0 ATA和2.5 ATA间，1.5ATA和3.0ATA间差异均无统计学意义(P＞0.05)。
　　 结论：(1)高压氧预处理可能通过上调抗氧化酶活性减轻局灶性脑皮层缺血-再灌注缺血半暗带的自由基损伤和神经元凋亡。(2)另外高压氧预处理可能通过下调皮层缺血半暗带神经元线粒体水平的凋亡反应减轻大鼠脑缺血-再灌注损伤。1.5 ATA～3.0 ATA间为HBO预处理的安全有效压力，同时2.0 ATA和2.5 ATA下HBO预处理减轻局灶性脑缺血-再灌注缺血半暗带损伤能力优于1.5 ATA和3.0 ATA。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词表

声明

前言

第一章不同压力高压氧预处理对大鼠局灶性脑缺血-再灌注后神经行为学和脑梗塞面积的影响

第二章：不同压力高压氧预处理对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤脑缺血半暗带氧化应激系统和凋亡反应的影响

结论

参考文献

在读期间参加科研和发表文章

致谢