注射性坐骨神经损伤后针刺对大鼠腓骨长肌GlyRS表达和超微结构改变的影响

摘要

目的：建立注射性坐骨神经损伤致大鼠腓骨长肌萎缩模型，探索腓骨长肌萎缩后电针（Electroacupuncture, EA）对腓骨长肌甘氨酰tRNA合成酶（glycyl-tRNA synthetase, GlyRS）表达和超微结构改变的影响，从蛋白质合成角度初步解析针刺治疗改善肌萎缩的机制。
　　方法：1.实验动物分组：成年SD大鼠108只，不拘雌雄，体重200±50g，7~9周龄，分为4组：对照组（Control, CON）；青霉素注射坐骨神经损伤组(Sciatic nerve injury, SNI），包括青霉素注射坐骨神经损伤后1w、2w、4w和6w四个时间点的亚组；对照+电针组（CON+EA），包括电针刺激正常大鼠环跳穴（GB30）和后三里穴（ST36）2w和4w两个亚组；坐骨神经损伤+电针治疗组（SNI+EA），包括青霉素注射坐骨神经损伤2w后电针刺激GB30和ST362w和4w两个亚组。共9小组，每组12只。2.大体观察。3.检测坐骨神经功能指数（Sciatic functional index，SFI）。4.称量肌重。5.HE染色后图像分析软件测量肌纤维横切面积。6.透射电镜观察肌纤维超微结构。7.RT-PCR和western blot技术检测GlyRS和肌球蛋白重链Ⅱb（MHC-Ⅱb）的表达水平。8.单因素方差分析。
　　结果：与CON组比较，SNI组中的1w和2w组SD大鼠患侧后肢跛行、拖曳；SFI下降，腓骨长肌肌湿重减轻，肌纤维横切面积减小，GlyRS和MHC-Ⅱb表达下降， P<0.05，有统计学意义；线粒体聚集与空泡化，肌浆网肿胀；4w组的肌湿重和肌纤维横切面积继续减小，而其他指标已有轻度的恢复；坐骨神经损伤6w时，上述各指标均出现不同程度的轻度恢复；CON+EA组无上述改变，P>0.05，无统计学差异。SNI+EA组的2w和4w组分别与SNI组中2w组比较，上述变化指标明显恢复，且恢复程度明显大于同时间点的SNI组中的4w和6w组，P<0.05，有显著的统计学意义。结论：青霉素注射大鼠坐骨神经损伤致腓骨长肌萎缩，与腓骨长肌GlyRS下调表达、线粒体和肌浆网等超微结构受损有关；电针刺激环跳（GB30）和后三里（ST36），可促进肌内GlyRS上调表达和超微结构恢复，利于蛋白质合成而改善肌萎缩。

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前言

1 材料与方法

1.1 低值易耗品及主要仪器设备

1.2 实验试剂

1.3 实验方法

1.4 实验流程图

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 大体观察

2.2 SFI变化

2.3 腓骨长肌肌重

2.4 HE染色和肌纤维横切面积测量

2.5 腓骨长肌超微结构变化

2.6 腓骨长肌内GlyRS及MHC-Ⅱb的mRNA表达变化

2.7 腓骨长肌内GlyRS及MHC-Ⅱb的蛋白表达变化

3 讨论

3.1 关于实验方案的构想

3.2 注射性坐骨神经损伤致肌萎缩模型的建立

3.3 电针对注射性坐骨神经损伤后腓骨长肌内GlyRS表达的影响

3.4 电针对注射性坐骨神经损伤后腓骨长肌超微结构变化的影响

4 结论

参考文献

综述: 甘氨酰-tRNA合成酶的结构、功能和致病机制研究进展

致谢

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