不同性别AD小鼠在慢性应激后CRFR1表达和行为改变

摘要

目的：观察不同性别及月龄的C57/BL6小鼠行为学变化和促肾上腺皮质激素释放因子受体-1（corticotropin-releasing factor receptor1，CRFR1）在不同脑区的表达；同时运用雌、雄性APP/PS1转基因小鼠在慢性应激后观察小鼠行为学改变和CRF/CRFR1-Gs-PKA信号在海马中表达情况。由此探讨CRFR1及CRFR1下游信号在不同性别中调节阿尔茨海默病（Alzheimer`s disease，AD）的病理生理机制及行为学的影响。
　　方法：将C57/BL6小鼠随机分为4组(每组10只)：5月龄雄性组，5月龄雌性组，20月龄雄性组，20月龄雌性组；采用APP/PS1+转基因小鼠建立慢性不可预知性温和应激模型（chronic unpredictable mild stress model， CUMS），随机将6月龄APP/PS1+小鼠分为4组（每组8-10只）：APP/PS1雄性组，APP/PS1雌性组，CUMS APP/PS1雄性组，CUMS APP/PS1雌性组。运用旷场实验、光/暗盒测试、糖水偏好实验检测小鼠焦虑样或类似焦虑症活动行为学改变，新奇物体检测、水迷宫评估小鼠的识别记忆力以及空间定位学习记忆能力；并运用免疫印迹法检测相应脑区的CRFR1和PKA的蛋白表达变化。
　　结果：⑴不同月龄的雌、雄性C57/BL6小鼠均无抑郁及焦虑行为学改变；在认知功能新奇物体识别实验中，5月龄的雄性组新物体认知指数百分比较雌性组明显较低（P<0.05），而随着年龄的增长，20月龄雌性组相比5月龄雌性组新物体认知指数百分比下降较明显（P<0.05）。20月龄雌、雄性C57/BL6小鼠杏仁核、下丘脑中CRFR1表达比5月龄小鼠表达量均明显减少（P<0.05）；而20月龄的雌、雄性C57/BL6小鼠大脑皮层中CRFR1蛋白表达量较5月龄小鼠均明显增高（P<0.05）；20月龄雄性组海马组织中CRFR1表达明显低于20月龄雌性组（P<0.05）。⑵慢性应激后，在旷场实验测试中CUMS APP-Female组小鼠与CUMS APP-Male组比较在中心区探索距离明显减少（P<0.01），有明显焦虑样行为学改变；CUMS APP-Female组小鼠与APP-Female组比较学习记忆能力明显减退（P<0.05），同时CRFR1和PKA蛋白在海马中的表达均明显升高（P<0.01），且海马中CRFR1的表达CUMS APP-Male组明显低于CUMS APP-Female组小鼠（P<0.05）。
　　结论：①在无应激源刺激的情况下，随着年龄的增长CRFR1下丘脑及杏仁核组织的表达量减少，而青年组与老年组小鼠均无焦虑行为学改变。相反，随着年龄的增长老年组小鼠海马及大脑皮层中CRFR1表达量增高，同时伴有认知记忆行为学改变，其中以雌性小鼠变化最为显著。②APP/PS1转基因小鼠在慢性不可预知温性应激后出现焦虑、认知功能障碍，同时伴有海马组织内的CRFR1和PKA蛋白表达相应增高，均以雌性CUMS APP/PS1转基因小鼠最为明显。

目录

声明

中英文缩略词表

前言

1 材料与方法

1.1 主要实验设备

1.2 主要实验试剂

1.3 实验方法

1.4 统计学方法

技术路线图

2 结果

2.1 雌、雄性C57/BL6小鼠在不同年龄段的行为学表现

2.2 CRFR1蛋白在5、20月龄雌、雄性C57/BL6小鼠大脑相关区域的表达

2.3 CUMS对雌、雄性APP/PS1转基因小鼠行为的影响

3 讨论

4结论

参考文献

综述:促肾上腺皮质激素释放激素受体-1对阿尔茨海默病影响的研究进展

致谢

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