声明
第一章 前言
1.1 环境内分泌干扰物概述
1.2 氯酚类化合物
1.2.1 氯酚简介
1.2.2 氯酚污染现状及毒性效应
1.3 2,4-二氯酚（2,4-dichlorophenol, 2,4-DCP）
1.3.1 2,4-二氯酚简介
1.3.2 2,4-DCP毒理研究现状
1.4 鱼类的性别决定和性别分化
1）遗传因素
2）环境因素
1.5 斑马鱼
1.5.1 斑马鱼简介
1.5.2 斑马鱼的性别决定和性别分化1) 斑马鱼的性别决定
1.6 鱼类性激素及性激素合成相关基因
1.6.1性激素的合成与代谢途径
1.6.2性激素在鱼类性别分化中发挥重要作用
1.6.3 性激素合成相关基因的研究进展1）芳香化酶基因（cyp19a1）
1.7 环境内分泌干扰物对鱼类性别分化影响及其机制
1.8 DNA甲基化与去甲基化
1.8.1 DNA甲基化与去甲基化概述
1.8.2 环境内分泌干扰物对DNA甲基化和去甲基化的影响
1.9 法倔唑（Fadrozole）
1.10 选题意义
第二章 材料与方法
2.1 主要实验材料与试剂
2.1.1 实验动物
2.1.2 实验试剂
2.1.3 主要实验仪器
2.1.4 溶液配制
2.2 实验方法
2.2.1 斑马鱼养殖、繁殖及幼鱼的养殖
2.2.2 对斑马鱼进行2,4-DCP暴露及取样
2.2.3 体况检测
2.2.4 性腺解剖和冰冻切片鉴定性别
2.2.5 性激素水平检测
2.2.6 荧光实时定量PCR（RT-qPCR）
2.2.7 重亚硫酸盐修饰测序法（BSP）
2.3 统计与分析
第三章 实验结果
3.1 2,4-DCP对斑马鱼体况的影响
3.2 2,4-DCP对斑马鱼性比的影响
3.3 2,4-DCP对斑马鱼体内VTG水平和vtg表达的影响
3.4 2,4-DCP对斑马鱼性激素水平的影响
3.5 法倔唑与2,4-DCP联合处理对斑马鱼性比和性激素水平的影响
3.6 2,4-DCP对性激素合成相关基因表达的影响
3.7 法倔唑与2,4-DCP联合处理对性激素合成相关基因表达的影响
3.8 2,4-DCP对cyp19a1a和cyp19a1b基因启动子甲基化水平的影响
第四章 讨论
4.1 2,4-DCP导致斑马鱼性别比例偏向雌性
4.2 2,4-DCP具有潜在的雌激素效应
4.3 2,4-DCP改变性激素水平
4.4 2,4-DCP通过改变性激素水平影响斑马鱼性别分化
4.5 2,4-DCP改变性激素合成相关基因的表达
4.6 法倔唑对性激素合成相关基因的影响
4.7 2,4-DCP可通过引起cyp19a1a启动子去甲基化促进基因表达
第五章 结论与展望
5.1 主要结论
5.2 研究展望
参考文献
附录
在校期间研究成果
致谢
兰州大学;
