肠部分切除吻合术对豚鼠小肠cajal间质细胞的影响

摘要

目的:通过制作豚鼠十二指肠部分切除吻合术模型,结合免疫组化、免疫荧光、肌电活动记录等方法观察cajal间质细胞在修复过程中的数量、分布及生长情况,了解cajal间质细胞的突起能否通过生长延长重新形成细胞网络,探讨cajal间质细胞的自主节律性;同时探讨药物甲磺酸伊马替尼是否对cajal间质细胞的生长和肌电活动产生影响,肠蠕动功能是否能够得到恢复,最终为防治和治疗胃肠运动功能障碍性疾病提供实验依据。
　　方法:1、动物分组:选用90只健康雄性清洁级豚鼠,体重200~250g。动物随机分成两组、A组正常对照组(10只)。B组为手术组(80只)分为术后自由喂养组和术后给药两组,每组40只。2、模型建立与取材:给予戊巴比妥钠腹腔注射进行动物麻醉实施十二指肠部分切除吻合术,术后各组均按7、15、30、50天分别处死后,取吻合部位肠管。3、组织病理检查:麻醉后取出吻合部位经HE及免疫组化和免疫荧光染色后,光镜下观察记录。4、肌电活动检测:麻醉后取出吻合部位,将电极插入肌层,通过BL-420系统检测肠道肌电活动情况。
　　结果:1.术后动态观察吻合处生长情况:肉眼观察未见粘连、感染、梗阻、出血及瘘口,吻合口头端和尾端肠管末见狭窄或膨胀。纵行切片经HE染色光镜下观察,正常对照组可见正常的十二指肠纵行结构,各层组织清晰。手术组十二指肠吻合部位可见吻合口肠腔面为粘膜上皮覆盖,浆膜面为结缔组织所覆盖,吻合部位也可见较多的结缔组织,内含大量胶原纤维、成纤维细胞及毛细血管,但未见明显的炎性细胞侵润,肠壁平滑肌层结构紊乱。2.术后cajal间质细胞的再生情况?免疫组化K1T阳性细胞数量(个/400倍镜下):正常对照组(16.1±0.93);术后7天组(1.32±0.21);给药7天组(1.3±0.17);术后15天组(2.71±0.29);给药15天组(1.34±0.11);术后30天组(6.99±0.98);给药30天组(6.14±0.82);术后50天组(11.29±1.42);给药50天组(8.06±1.14);?免疫荧光K1T阳性细胞数量(个/400倍镜下):正常对照组(9.49±0.66);术后7天组(2.28±0.64);给药7天组(1.41±0.22);术后15天组(2.41±0.62);给药15天组(2.23±0.5);术后30天组(6.19±0.44);给药30天组(5.56±0.6);术后50天组(8.31±0.77);给药50天组(7.72±0.72)。3.肌电活动记录:正常对照组波幅(31.47±0.84)μV频率(17.52±0.55)次/min;术后7天组波幅(25.48±0.74)μV频率(13.66±0.62)次/min;给药7天组波幅(22.97±0.62)μV频率(12.37±1.24)次/min;术后15天组波幅(30.89±0.78)μV频率(15.25±0.97)次/min;给药15天组波幅(29.23±0.66)μV频率(14.02±0.62)次/min;术后30天组波幅(31.63±0.56)μV频率(16.66±0.95)次/min;给药30天组波幅(31.06±0.85)μV频率(17.26±0.62)次/min;术后50天组波幅(31.06±0.9)μV频率17.25±0.62次/min;给药50天组波幅(31.28±0.58)μV频率(16.92±0.48)次/min。
　　结论:豚鼠行小肠部分切除吻合术后,能够减慢肠道的自发节律性活动。但随着吻合口的愈合,发现Cajal间质细胞具有再生的能力,能够修复受损细胞网络的延续性和完整性,肠道自发节律性活动可以得到恢复。而且药物甲磺酸伊马替尼与抑制Cajal间质细胞的再生速度和数量有关,并能够影响肠道自发节律性活动。

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封面

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中文摘要

前 言

材料与方法

1 材料

1.1主要试剂

1.2 常用试剂配制

2 实验方法

2.1 十二指肠部分切除吻合术模型建立

2.2 取材、标本制备及染色

2.4 统计学分析

结 果

1. 十二指肠部分切除吻合术后肠道的一般情况

2. 十二指肠部分切除吻合术后肠道的KIT免疫酶标细胞化学染色观察

3.统计学分析

讨 论

结 论

资金支持

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致谢

参考文献

声明

综述