自体骨膜细胞移植修复Beagle犬Ⅲ度根分叉病变的实验研究

摘要

第一部分：两种培养基对狗骨膜细胞生物学行为的影响 目的： 研究不同培养基对Beagle犬骨膜细胞生物学行为的影响，为牙周组织工程中种子细胞的培养寻找合适的培养基。 方法： 取成年Beagle犬颌骨骨膜块，分别用两种培养基(DMEM和RPMI1640)对其组织块进行培养，观察其细胞游出率、传代后细胞增殖能力、碱性磷酸酶活性和矿化结节形成能力。分析两种培养基培养结果，比较其对体外培养的骨膜细胞影响。 结果： DMEM培养组组织块细胞游出率、传代细胞增殖能力、碱性磷酸酶活性和矿化结节形成能力均高于RPMI1640组。 结论： 在DMEM和RPMI1640两种培养基中，DMEM培养基更适合骨膜细胞的增殖和成骨分化。 第二部分：磷酸三钙陶瓷对狗骨膜细胞生物学行为的影响 目的： 检测B一磷酸三钙陶瓷(β -TCP)对骨膜细胞生长、增殖和分化特点的影响，探讨β-TCP作为牙周组织工程支架材料的可行性。 方法： 组织块法培养的骨膜细胞经传代培养后，接种于β－TCP上培养。通过MTT、流式细胞术和碱性磷酸酶试剂盒检测骨膜细胞的增殖和成骨分化情况，并通过扫描电镜观察细胞在材料表面生长情况。 结果： 骨膜细胞与β－TCP共培养后，仍能维持其增殖能力，在材料表面贴附生长良好，并保持其成骨分化潜能。 结论： β－TCP适合骨膜细胞生长和成骨分化，适合作为牙周组织工程的支架材料。 第三部分：骨膜细胞移植修复Beagle犬Ⅲ度根分叉病变的实验研究 目的： 应用自体骨膜细胞移植并结合膨体聚四氟乙烯(e-PTFE)膜引导牙周组织再生术(GTR)修复Beagle犬Ⅲ度根分叉病变，探讨其用于牙周组织再生的可行性。 方法： 人工构建4只成年Beagle犬慢性Ⅲ度根分叉病变模型，将24颗受试牙随机分成三组，A组：e-PTFE＋β－TCP+骨膜细胞；B组：e-PTFE+β-TCP；C组：e-PTFE，即单纯GTR组。每组8颗牙，治疗期间不采用任何口腔卫生措施。术后12周取下颌骨标本，因各组各有2颗牙在造模过程或治疗过程中出现根分叉穿孔或牙龈严重退缩，最终各组有6颗牙作组织学分析，苏木精-伊红(HE)染色和Mallory三色法观察牙周组织再生情况。 结果： 动物实验发现C组的新生牙骨质和牙周膜的长度分别为3.37±1.21mm和1.33±0.31mm，分别占总缺损长度的31.67％±12.83％和17.70％±5.35％，牙槽骨生成的面积为2.35±1.26 mm2，占总缺损面积的22.62％±7.33％；B组的新生牙骨质和牙周膜的长度分别为4.71±1 47 mm和2.34±0.47mm，分别占总缺损长度的43.02％±8.08％和22.18％±5.19％，牙槽骨生成的面积为3.71±2.00mm2，占总缺损面积的34.77％±15.38％;A组的新生牙骨质和牙周膜的长度分别为5.53±1.34mm和3.71±1.82mm，分别占总缺损长度的50.77％±8.19％和33.64％±13.83％，牙槽骨生成的面积为6.21±2.18mm2，占总缺损面积的60.23％±18.16％。A组的牙周膜的长度、新生牙槽骨面积及各自在总缺损长度或面积中所占的比例与C组和B组比较，其差异均具有统计学意义( P<0.05)。同时，A组的新生牙骨质长度及在总缺损长度中所占的比例与C组比较，其差异也具有统计学意义(P<0.05)。 结论： 应用自体骨膜细胞移植结合引导牙周组织再生术有望促进牙周组织缺损的修复。

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论文说明：缩略词表

声明

前言

实验一 两种培养基对狗骨膜细胞生物学行为的影响

实验二 β-磷酸三钙陶瓷对狗骨膜细胞生物学行为的影响

实验三 骨膜细胞移植修复Beagle犬牙周Ⅲ度根分叉病变的实验研究

全文总结

综述：骨膜细胞成骨能力及其复合移植研究进展

致谢