肝细胞生长因子对大鼠肺移植缺血再灌注损伤的保护作用

摘要

肺移植已成为肺纤维化、原发性肺动脉高压、肺气肿、支气管扩张等慢性终末期肺病的最有效治疗措施，在肺移植中缺血再灌注所致肺损伤是移植失败和早期肺移植患者死亡的主要原因，因而如何减轻缺血再灌注损伤已成为现阶段研究的重要课题。缺血再灌注的病理生理过程中，氧自由基的快速大量产生及细胞间Ca2+积聚，这两种情况均可导致细胞凋亡的发生。肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor HGF)具有很强的促进肺上皮细胞生长、抑制缺血-再灌注诱导的肺上皮细胞凋亡作用，故我们运用HGF的抗凋亡活性，起到减轻肺缺血再灌注的损伤的作用。课题分为以下两个部分： 第一部分：改良三袖套法建立大鼠左肺原位移植动物模型 目的：探讨建立更稳定有效的大鼠原位左肺移植模型。 方法：将40只SD大鼠随机配对，采用三袖套法建立大鼠肺移植模型。 结果：进行大鼠左肺原位移植正式实验20例，手术平均时间(65±4)min。手术成功率85％。血气、病理学等检查证实成功复制了肺移植缺血再灌注模型。 讨论：该方法操作成功率高，经济实用，高度模仿临床肺移植，可用于肺移植缺血再灌注损伤的实验研究。 第二部分：肝细胞生长因子对大鼠肺移植缺血再灌注损伤的保护作用 目的：通过建立大鼠肺移植缺血再灌注模型，探讨肝细胞生长因子对大鼠肺移植缺血再灌注损伤的影响及其作用机制。 方法：实验分3组，即假手术对照组(A组)、空白对照组(B组)和HGF组(C组)，每组8例。B组用4℃LPDG液灌洗并保存供肺4h，C组用含HGF(10ug/100ml)的4℃LPDG液灌洗并保存供肺4h。移植肺再灌注2h后结束实验。测定肺组织湿—干重比、MPO活性，观察移植肺组织病理改变，ELISA测定TNF-α表达水平，免疫组化染色检测c-met表达，RT-PCR检测Bcl-2 mRNA的水平，TUNEL检测细胞凋亡。 结果：与空白对照组比较，HGF组肺组织损伤程度明显减轻，肺组织湿干重比、MPO活性、TNF-α均有下降(P<0.01)。c-met、Bcl-2 mRNA的表达水平较空白对照组明显增加(P<0.01)。 讨论：HGF能有效地减轻移植肺缺血再灌注损伤，明显改善移植肺功能，其保护作用可能与刺激c-met的表达，增加抗凋亡基因bcl-2的表达有关。

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文摘

英文文摘

论文说明：英汉缩略词表

声明

前言

第一部分 改良三袖套法建立大鼠左肺原位移植动物模型

实验目的

实验材料与方法

结果

讨论

组图

第二部分 肝细胞生长因子对大鼠肺移植缺血再灌注损伤的保护作用

实验目的

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

致谢

综述 肺缺血再灌注损伤的机制及保护