罗格列酮、咪达普利单用和联合治疗癌症恶病质的实验性研究

摘要

目的:罗格列酮、咪达普利改善癌症恶病质通过不同的作用机制，观察罗格列酮、咪达普利单独和联合应用对小鼠癌症恶病质的治疗作用,并初步探讨其中可能的发生机制。
　　方法:于雄性BALB/C小鼠前腋窝皮下接种小鼠结肠腺癌colon26（C26）细胞，9天后癌症恶病质模型基本建立。40只小鼠随机分为5组：A组：健康对照组；B组：恶病质对照组；C组：罗格列酮治疗组；D组：咪达普利治疗组；E组：罗格列酮联合咪达普利治疗组。每天按时用药并监测小鼠食物摄入量、小鼠体质量及肿瘤体积。第16天，记录小鼠腓肠肌、附睾脂肪、去瘤体质量，监测血清生化指标、IL-6、TNF-a水平，用免疫组化SP法检测肿瘤组织中NF-κB的表达，用real-time PCR法检测腓肠肌中atrogin-1和MuRF-1基因的表达情况。
　　结果:1.癌症恶病质动物模型的建立：后四组小鼠皮下接种colon-26细胞5-6天后，肿瘤可于腋窝皮下触及。9天后长至约1cm3大小，小鼠开始出现颈背部毛色发暗、竖立、脱落和活动迟缓，活动减少，虚落等表现；与正常对照组相比差别有统计学意义（P<0.05）,即进入恶病质状态。
　　2.小鼠体质量、肿瘤生长、摄食量比较：接种当天，五组间小鼠初始体质量无明显差异。大约至接种第5天，所有荷瘤鼠皮下均可触及肿瘤；当肿瘤长至1cm3后生长迅速；接种后9天，荷瘤组小鼠质量都低于健康对照组(P<0.05)，荷瘤小鼠均进入恶病质状态。至第16天，各组终末体质量无统计学差异(P>0.05)，B、C、D、E组终末去瘤体质量均与A组有显著差别(ALL，P<0.01)，C、D、E三组治疗组小鼠去瘤体质量较B组分别上升7.5％、8.8%、9.8%(ALL，P<0.05)。各组间食物摄入量无统计学差异(P>0.05)。
　　3.双侧腓肠肌及双侧附睾脂肪质量的比较：在治疗7天后，接种肿瘤的4组小鼠双侧腓肠肌质量均明显低于健康对照组(P<0.01)。C、D、E组小鼠双侧腓肠肌质量分别较B组升高9.9%、11.6%、14.5%，而C、D、E组之间腓肠肌质量的差异无统计学意义(ALL,P>0.05)；接种肿瘤的4组小鼠双侧附睾脂肪质量均明显低于健康对照组(ALL，P<0.01)。C、D、E组小鼠双侧附睾脂肪质量较B组分别升高了106.3%、50.7%、116.0%，C、E组双侧附睾脂肪质量高于 D组(ALL，P<0.05)。
　　4.营养指标的比较：在治疗7天后，与健康组A组比，B、C、D、E组血清总蛋白、白蛋白和血糖水平显著下降(ALL,P<0.01)；各用药组血清总蛋白、白蛋白、血糖水平比较：其中E组血清总蛋白水平明显高于B组(P<0.01)，E组血清白蛋白水平高于B组(P<0.05)，D组血糖水平高于B组(P<0.05)，E组血糖水平显著高于B组(P<0.01)。甘油三酯水平，B组明显高于A组水平(P<0.01)，D组明显低于A、B组水平(P<0.01)，E组高于A组水平(P<0.05)。
　　5.血清因子水平变化：在治疗7天后，IL-6水平：B、C、D组较A组明显升高(ALL,P<0.01)，E组较A组升高（75.83±37.68VS23.73±12.09，P<0.05），C、D、E组水平较B组无显著差异（ALL，P>0.05）。TNF-a水平：B、C、D、E组较A组明显升高(ALL，P<0.01)，C、D、E组较 B组分别下降28.3%、22.7%、30.3%(ALL，P<0.01)；胰岛素水平：B、C、D、E组较A组下降，但是仅B组与A组有差异（199.20±33.83VS332.72±41.08，P<0.05），C、D、E组较B组分别升高了51.5%、30.7%、33%，但仅C组较B组升高有差异(301.87±37.35vs199.20±33.83，P<0.05)。
　　6.NF-κB表达的比较：C、E组在抑制NF-κB的p65核移位方面与恶病质组B组比具有差异性(C组23.50±10.03vs B组34.50±5.50，P<0.05；E组19.38±9.12vs B组34.50±5.50，P<0.01)。综合评分方面，以E组抑制效果最明显，而且与恶病质B组相比具有差异性(3.38±1.60 vs5.13±1.25，P<0.05)。
　　7.Atrogin-1及MuRF-1的表达的比较：atrogin-1和MuRF-1基因：B、C、D、E组的表达水平与A组比较均升高（ALL，P<0.05）。其中atrogin-1基因：C、D、E组较B组分别下降了63%、30%、65%（ALL，P<0.05）；MuRF-1基因：C、E组较B组分别下降了33%、24%（ALL，P<0.05），D组与B组比较无差异（P>0.05）。
　　结论:1.癌症恶病质小鼠去瘤体质量降低、营养状态失衡；内源性细胞因子IL-6、TNF-a等的激活，NF-κB的激活，泛素蛋白酶系统atrogin-1和MuRF-1基因的过度表达均是导致癌症恶病质的可能机制。
　　2.罗格列酮+咪达普利联合治疗的效果优于单一用药效果，二者联合应用时具有协同作用。

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前言

材料和方法

1．材料

2.方法

结果

1．小鼠体质量、 肿瘤生长、摄食量比较

2.双侧腓肠肌及双侧附睾脂肪质量的比较

3.营养指标的比较

4.血清因子水平变化

5．NF-κB表达的比较

6 . A t r og in-1及MuRF-1的表达的比较

讨论

结论

参考文献

癌症恶病质的药物治疗进展

参考文献

致谢