胃癌干细胞在胃癌侵袭、转移中的作用及血管形成能力的研究

摘要

目的：比较胃癌肿瘤干细胞CSC-G和普通胃癌细胞SGC7901的生物学特性，来阐明肿瘤干细胞在胃癌侵袭、转移中的作用；并研究CSC-G的血管形成能力，来探讨肿瘤干细胞在肿瘤血管生成过程中的重要性。
　　方法：通过Real-time PCR、Western-blot以及细胞免疫组化，检测CSC-G细胞与SGC7901细胞中干细胞标志基因OCT4、SOX2、c-Myc和Klf4的表达水平；进行球形克隆形成实验、平板克隆实验、Transwell侵袭性实验和裸鼠成瘤实验，检测CSC-G细胞与SGC7901细胞的致瘤性、侵袭性；检测CD44、E-cadherin的mRNA和蛋白表达水平，比较两组细胞的转移能力；通过MTS实验，检测两组细胞对L-OHP和5-FU的耐药性；利用细胞划痕实验、Transwell迁移实验和成环实验，检测CSC-G细胞与SGC7901细胞的血管形成能力。
　　结果：Real-time PCR结果显示，CSC-G中OCT4、SOX2、Klf4和CD44的mRNA相对表达量与SGC7901组相比显著提高，差异具有统计学意义(P<0.05)，而c-Myc mRNA相对表达量两者差异无统计学意义（P>0.05），CSC-G组E-cadherin的mRNA相对表达量低于SGC7901组，差异具有统计学意义(P<0.05)。Western-blot及免疫组化结果与Real-time PCR结果相符。球形克隆实验和平板克隆实验提示CSC-G细胞形成的克隆球数量多于SGC7901细胞组，差异具有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验和细胞划痕实验结果提示，CSC-G细胞的迁移和侵袭能力高于SGC7901细胞组，差异有统计学意义(P<0.05)。MTS实验结果示，CSC-G细胞对化疗药物L-OHP和5-FU的IC50均高于SGC7901细胞组，差异有统计学意义(P<0.05)。裸鼠成瘤实验结果提示，CSC-G细胞的体内成瘤能力与SGC7901细胞组相比明显提高，差异有统计学意义(P<0.05)。成环实验结果示CSC-G所形成的环数多于SGC7901组，差异有统计学意义(P<0.05)。
　　结论：胃癌肿瘤干细胞的侵袭力、致瘤性及耐药性明显高于普通胃癌细胞，而且具有较强的迁移能力和血管形成能力。因此，胃癌肿瘤干细胞的存在可能是胃癌复发、转移及耐药的机制之一。而且CSC-G具有明显的迁移能力与血管形成能力，提示肿瘤干细胞可能通过形成血管能力来促进胃癌的发生和发展。

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ABSTRACT

第一章 前言

1.1. 肿瘤干细胞理论的形成与发展

1.2. 肿瘤血管生成理论的发展

第二章 材料与方法

2.1 主要材料：

2.2实验方法：

2.3 统计学方法

第三章 实验结果

3.1 胃癌干细胞的培养

3.2胃癌干细胞的鉴定

3.3胃癌干细胞与普通胃癌细胞生物学特性的比较

3.4 胃癌干细胞在肿瘤血管形成中的作用

第四章 讨论与结论

4.1 讨论

4.2 结论

参考文献

致谢

综述