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汉江硅藻水华优势种生理生态学研究

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文摘

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引言

1.水华现象及水华生物概述

1.1什么是水华

1.2水华的危害

1.3常见的水华藻类

1.4水华藻类分子鉴定

2.水华研究进展

2.1国内外水华发生频率及状况

2.2水华发生机理与成因的研究进展

2.3水华监测与防治

3.本研究目的意义

第一部分汉江水华硅藻季节性消长与理化因子调查

1.采样地点

2.试剂与仪器

2.1试剂

2.2仪器

3方法

3.1浮游藻类定量分析

3.2水中总氮含量测定方法

3.3水中总磷含量测定方法

4结果与分析

4.1汉江主要浮游藻类定性分析

4.2汉江浮游藻类定量分析

4.3汉江水华优势种(硅藻)数量与水体理化因子关系

5.小结

第二部分汉江硅藻水华优势种的分类地位的探讨

1.材料

2.试剂与仪器

2.1试剂

2.2仪器

3.方法

3.1硅藻壳的制作

3.2模板DNA制备

3.318SrDNA的PCR扩增,扩增产物纯化及连接

3.4转化感受态DH5α

3.5转化重组菌的筛选

4.结果与分析

4.1汉江水华优势种形态特征

4.2利用18S rDNA序列分析确定硅藻水华优势种的分类地位

5讨论

5.1汉江硅藻水华优势种的系统分类学地位探讨

第三部分环境因子对汉江硅藻水华优势种生长生理影响

1材料

2试剂和仪器

2.1试剂

2.2仪器

3方法

3.1藻种分离纯化-毛细管分离法

3.2藻种培养条件与方法

3.3叶绿素a含量测定

3.4类胡萝卜素含量测定

3.5比增长速率的计算方法

3.6蛋白含量测定方法(考马斯亮蓝结合法)

3.7氧电极法测定光合放氧

3.8培养液中总氮含量测定

3.9培养液中总磷含量测定

4.结果与分析

4.1汉江硅藻水华优势种的分离纯化及培养生理

4.2环境因子对汉江硅藻水华优势种生长生理的影响

4.2环境因子对汉江硅藻水华优势种生长生理的影响4.2.1不同硝酸氮浓度对硅藻水华优势种生长生理的影响

4.2环境因子对汉江硅藻水华优势种生长生理的影响4.2.2不同磷浓度对汉江硅藻水华优势种生长生理的影响

4.2环境因子对汉江硅藻水华优势种生长生理的影响4.2.3不同铁浓度对汉江硅藻水华优势种生长生理的影响

4.2环境因子对汉江硅藻水华优势种生长生理的影响4.2.4不同硅酸盐浓度对汉江硅藻水华优势种生长生理影响

4.2环境因子对汉江硅藻水华优势种生长生理的影响4.2.5温度对水华硅藻生长生理影响

4.2环境因子对汉江硅藻水华优势种生长生理的影响4.2.6光照强度对汉江硅藻水华优势种生长影响

4.2环境因子对汉江硅藻水华优势种生长生理的影响4.2.7初始pH值对汉江硅藻水华优势种生长的影响

4.2环境因子对汉江硅藻水华优势种生长生理的影响4.2.8氮、磷、硅、温度四因素三水平正交实验

4.3汉江硅藻水华优势种对氮、磷吸收实验

5.讨论

5.1水体营养盐与汉江水华硅藻关系

5.2温度、光照与水华硅藻的关系

5.3汉江水华硅藻增殖的限制性因子探讨

第四部分水华硅藻和水华蓝藻的生长特性比较研究

1.材料

2.培养基

3.试剂和仪器

4.方法

4.1藻种培养方法

4.2叶绿素a提取方法[33]

4.2比增长速率计算方法[70]

5.结果与分析

5.1不同温度下水华硅藻与水华蓝藻的生长特性比较

5.2不同光照条件下水华硅藻与水华蓝藻的生长特性比较

5.3不同pH条件下水华硅藻与水华蓝藻的生长特性比较

5.4不同磷浓度下水华硅藻与水华蓝藻的生长特性比较

5.5不同氮浓度条件下水华硅藻与水华蓝藻的生长特性比较

6讨论

结论

致谢

参考文献

附录:汉江水华硅藻优势种的18srDNA序列

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摘要

河流营养物污染导致硅藻水华爆发是近年来频繁发生的环境问题。目前,国内外对湖泊、水库常见蓝藻的水华研究较多,对江河硅藻水华的系统研究则明显滞后。为了探究河流硅藻水华成因,本文以汉江水华成因种为研究对象,开展以下几个方面研究。1.对汉江浮游藻类组成与数量的季节性变化进行调查,同时分析水华种的季节性消长与汉江理化因子的关系。结果表明汉江浮游植物以硅藻为主。水华硅藻从丰水季节到枯水季节,随着水温的下降,其数量增多。硅藻水华发生与水体氮、磷含量超标明显相关。2.为确定汉江水华硅藻优势种的分类地位,对该水华硅藻的形态特征进行电镜观察,结果表明该藻与小环藻属、冠盘藻属比较相似。进一步对该藻的.18SrDNA序列进行测序,并与其它亲缘关系相近的属种进行比较,结果表明该水华藻与冠盘藻属亲缘性较近。3.对汉江硅藻水华优势种分离纯化,并摸索出该藻适宜的培养条件,在此基础上,系统研究了氮、磷、铁、硅这些营养因素以及温度、光照、初始pH对该藻生长生理的影响。4.对该水华硅藻的氮、磷吸收动力学进行了初步探究。5.为揭示水华硅藻和水华蓝藻在发生机制上的异同。

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