枇杷种质离体保存及生理生化研究

摘要

该研究以枇杷(Erilbotrya japonica Lind I.)为材料,进行了枇杷种质资源离体保存及生理生化的研究.主要包括枇杷快繁体系的建立;枇杷小苗常温限制生长保存和低温保存条件下的生理生化研究;枇杷花粉的超低温保存研究;枇杷种胚超低温保存的脱氢酶活性研究几个方面.1、枇杷快繁体系的研究.试验中建立了茎尖、幼胚两种枇杷快繁体系.在茎尖快繁体系中,用饱和漂白粉溶液前处理和选择适当大小的外植体,可能有效地防止茎段褐变,提高茎尖培养成活率.培养基BA1.0mg/l+NAA0.5mg/l组合可有效地促进茎尖的发育.2、枇杷小苗常温限制生长保存和低温保存的生理生化研究.枇杷离体保存所用培养基为MS基本培养基,低温(11±1℃)保存培养基中加入蔗糖2.5﹪,琼脂0.75﹪,常温限制生长所加植物生长抑制剂为多效唑(PP<,333>)5mg/L,蔗糖为2.5﹪和5﹪两种,琼脂为0.75﹪,研究蔗糖和温度对枇杷小苗离体保存的影响.在对枇杷小苗长达六个月的保存过程中,对与植物逆境生理和代谢调控有关的几个生理指标和呼吸速率、叶绿素和蛋白含量以及多酚氧化酶活性和过氧化物酶活性等进行了检测.3、枇杷花粉的超低温保存研究.对经过干燥脱水至不同含水量的枇杷离体花粉进行了超低温(-196℃)保存实验.4、枇杷种胚超低温保存的脱氢酶活性研究.幼胚用60﹪玻璃化保护剂PVS2处理,然后进行液氮保存,经解冻处理后,进行脱氢酶活性测定.

目录

缩写词对照

Ⅰ前言

1.1植物种质资源保存的重要性和必要性

1.2种质的离体保存研究现状与进展

1.2.1种子保存

1.2.2果树的细胞、组织及器官保存

1.2.3常温及低温保存

1.2.4低氧保存

1.2.5超低温保存

1.2.6超低温技术在植物种质保存中的研究现状

Ⅱ枇杷快繁体系的研究

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

2结果与分析

2.1幼胚培养

2.2茎尖培养

2.2.1不同消毒方法对褐变率的影响

2.2.2培养基成份对茎尖成活率的影响

2.2.3茎尖大小对提高成活率的影响

Ⅲ枇杷种质常温和低温离体保存生理生化研究

1材料与方法

1.1材料

1.2呼吸速率测定

1.3叶绿素含量和可溶蛋白含量测定

1.4多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)活性测定

2结果与讨论

2.1 呼吸速率的变化

2.2叶绿素含量的变化

2.3 可溶蛋白含量的变化

2.4 PPO活性的变化

2.5 POD活性的变化

3 小结

Ⅳ花粉超低温保存研究

一、材料与方法

1.1材料

1.2花粉采集、处理与保存

1.3花粉含水量的测定

1.4花粉的快速解冻和生活力测定

二、结果与分析

2.1干燥时间与含水量及发芽率的关系

2.2在超低温保存下枇杷花粉含水量对其发芽率的影响

2.3常温下花粉含水量与离体萌发的关系

2.4花粉液氮保存时间对枇杷花粉发芽率的影响

2.5.化冻方式对花粉萌发力的影响

三、讨论

Ⅴ枇杷离体胚超低温保存脱氢酶活性的研究

1.材料和方法

1.1材料

1.2含水量

1.3冷冻程序

1.4脱氢酶活性测定

2.结果与分析

2.1超低温保存前脱氢酶活性的变化

2.2超低温保存后脱氢酶活性变化

3结果与讨论

Ⅵ小结与展望

参考文献

附录：图版

致谢