柑橘慢衰病诊断与微生态治理

摘要

2005年10月至2008年3月期间，对福建省柑橘半穿刺线虫(Tylenchulus semipenetrans)的分布与危害进行了较为系统的调查。福建省重要柑橘产区福州、宁德、三明、漳州、泉州5个地区均有柑橘半穿刺线虫的分布。在所调查的67个柑橘园中，发病柑橘园50个，占总调查果园的74.6％，果园株发病率5.0％～100％。 对柑橘半穿刺线虫的真菌区系进行了初步研究。从发生慢衰病的柑橘根系及根际土壤中分离真菌，共鉴定出6属8种，黄曲霉(Aspergillus flavus)、茄病镰孢(Fusarium solani)、淡紫拟青霉(Paecilomycs lilacinus)为优势种群，分别占所有分离物的23.8％、18.6％、12.8％。从柑橘半穿刺线虫雌虫上分离到食线虫真菌9属12种，其中以茄病镰孢、尖孢镰孢(F.oxysporum)、淡紫拟青霉为优势种群，分别占总分离物的36.6％、15.4％、9.76％。结果表明柑橘半穿刺线虫的侵染对菌根真菌幼套球囊霉(Glomus etunicatum)的生长具有抑制作用，幼套球囊菌的菌丝数量和泡囊数量明显减少。 进行了生防菌剂的研制和应用研究。从分离到的11株淡紫拟青霉菌株中筛选获得产孢量大、几丁质酶活力高、寄生性强的菌株He-5。该菌株适宜生长温度为20℃～30℃，pH值为5～8，耐盐碱能力较强，经离体测定其对柑橘半穿刺线虫胚胎期卵的寄生率为83.33％。 采用双相发酵工艺研制了淡紫拟青霉He-5生防菌剂。He-5菌株在液体发酵中能以微循环产孢方式产孢，在3％虾壳粉液体培养基培养96 h产孢量达31.08×107个·mL-1；菌株几丁质酶活力在5～6d达到最高峰。以谷壳、麸皮为固体培养基，通过调控温、湿度，实现大量快速产孢，6～8d产孢量可达120亿个·g-1。收集获得的孢子粉含孢量达130亿个·g-1以上，萌发率高达89.86％。 用He-5孢子粉配制成生防菌剂进行田间试验，结果表明He-5生防菌剂对柑橘半穿刺线虫具有良好防治作用，病株根际施用He-5生防菌剂后柑橘半穿刺线虫雌虫虫口密度下降44.90％。He-5施用后可以在柑橘根际定殖并形成优势种群，防治后10个月调查，土壤中He-5菌量维持在2.60×104cfu·g-1水平，改善根系微生态，促进柑橘根系健康。

目录

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摘要

第一章概述

1柑橘半穿刺线虫的分布与为害

1．1柑橘半穿刺线虫的分布

1．2柑橘半穿刺线虫的寄主范围

1．3柑橘半穿刺线虫的生物学特性

1．4柑橘半穿刺线虫的为害症状

2柑橘半穿刺线虫的防治措施

2．1检疫措施

2．2栽培管理

2．3选用抗性砧木

2．4化学防治

2．5生物防治

3本研究的目的与意义

4本研究基本路线

第二章柑橘慢衰病诊断与分布

1材料与方法

1.1调查地点

1．2调查方法

1．3线虫的分离、杀死与固定

1．4线虫的鉴定

1．5土壤中二龄幼虫的计数

2结果与分析

2．1柑橘半穿刺线虫的分布状况

2．2柑橘半穿刺线虫的为害症状

3讨论

3．1福建省柑橘慢衰病的分布调查

3．2柑橘半穿刺线虫引起的柑橘急性凋萎症状

3．3福建省柑橘黄化症的病因分析

第三章柑橘半穿刺线虫的真菌区系

1材料与方法

1．1样品采集

1．2培养基制备

1．3柑橘根及根际土真菌分离培养技术

1．4柑橘半穿刺线虫雌虫食线虫真菌分离

1．5真菌的保存与鉴定

1．6柑橘半穿刺线虫侵染的根系菌根真菌的观察

2结果与分析

2．1病根及根际土壤真菌的主要类群

2．2柑橘根及根际土壤真菌种类的分离率

2．3柑橘半穿刺线虫雌虫上分离的真菌种类

2．4柑橘半穿刺线虫雌虫上食线虫真菌的区系分析

2．5菌根真菌鉴定

2．6柑橘半穿刺线虫对菌根真菌幼套球囊霉的影响

3讨论

3．1柑橘慢衰病病根及根际土壤真菌区系分析

3．2柑橘半穿刺线虫雌虫食线虫真菌的种类及区系分析

3．3柑橘半穿刺线虫与菌根真菌关系

第四章淡紫拟青霉生防菌剂研制与应用

1材料与方法

1．1生防菌的筛选

1．2淡紫拟青霉He-5的生物学特性

1.3淡紫拟青霉He-5的双相发酵

1．4淡紫拟青霉He-5生防菌剂田间应用

2结果与分析

2．1淡紫拟青霉菌株的筛选

2．2 He-5的生物学特性

2．3 He-5的双相发酵

2．4淡紫拟青霉He-5生防菌剂的田间应用

3讨论

3．1淡紫拟青霉高效菌株的筛选

3．2菌株He-5的生物学特性

3．3 He-5的双相发酵工艺体系

3．4 He-5生防菌剂对柑橘慢衰病根系真菌区系的影响

第五章结语与讨论

1柑橘慢衰病诊断为当前大面积柑橘黄化的病因提出了新的认识

2柑橘半穿刺线虫的真菌区系为病害微生态治理提供了理论基础

3首次探讨了柑橘半穿刺线虫与柑橘菌根真菌的关系

4生防菌剂研制和应用

参考文献

附录：攻读硕士学位期间发表论文

致谢