LURP1诱导型启动子驱动下AtWRKY70表达载体构建及对水稻的遗传转化

摘要

LURP1(Late Upregulated in Response to Hyaloperonospora parasitica)是在拟南芥中发现的一种在真菌感染后期持续上调的抗性基因。LURP1启动子在拟南芥抗真菌病害中起重要调节作用[1]。植物特异转录因子AtWRKY70是一种在SA和JA介导的信号途径中的一个重要成员。AtWRKY70的表达受到SA的诱导,但是受JA的抑制。SA调控下产生的AtWRKY70是NPR1非依赖型的。通过组成型过表达AtWRKY70增加了植物对于真菌的抵抗性[2-5]。但将两者结合起来,是否具有更强的调控作用还不很清楚。本研究旨在完成相关的载体构建工作并转化水稻,获得水稻转基因植株,为进一步开展LURP1启动子及.AtWRKY70转录因子在水稻中的功能分析奠定基础。主要结果如下:
　　 1、构建了带有LURP1诱导型启动子的双元载体,并用此双元载体构建了LURP1诱导型启动子与gusA报告基因的表达载体,以及UYRP1诱导型启动子驱动下的转录因子AtWRKY70的表达载体,并进行了测序验证。
　　 2、开展了水稻农杆菌介导的遗传转化,从所获得的转基因植株中,PCR分别鉴定出13株pMLURP1：GUS和11株pMUYRP1-WRKY70 cDNA转基因植株。
　　 以上研究结果为进一步研究鉴定诱导型启动子LURP1及AtWRKY70在水稻中的抗性的功能,筛选生物活性小分子物质及进一步研究启动子与转录因子的互作详细机制奠定了基础。