SOCS1负性调节Kupffer细胞内毒素信号传导的研究

摘要

本研究立足肝脏，以MPS中最典型的Kupffer细胞和炎性介质中最典型的LPS为研究对象，通过建立内毒素耐受的小鼠及Kupffer细胞模型，并采用体外RNA干扰技术(RNAi)干扰小鼠腹腔巨噬细胞株RAW264.7细胞的SOCS1基因表达等策略，利用现代分子生物学手段，并结合光镜、免疫组化等方法，试图阐明SOCS1在肝组织及Kupffer细胞中内毒素耐受形成机制中的作用，实验结果如下：1.实验动物以LPS腹腔注射建立内毒素血症模型；并以LPS诱导建立内毒素耐受动物模型。结果发现在LPS注射后，肝组织中SOCS1 mRNA、TNF-α mRNA的表达快速增加，随后又逐渐下降；超微结构表现为kupffer细胞激活，吞噬功能增强；免疫组织化学可见肝组织中SOCS1的表达。2.采用原位灌注胶原酶消化法分离小鼠Kupffer细胞进行体外培养，并以LPS 10ng/ml的培养基孵育建立内毒素耐受细胞模型，以含LPS 100ng/ml的培养基作为刺激因素。结果发现，SOCS1和TNF-αmRNA的表达与动物实验结果相似；培养液的TNF-α水平因蓄积效应，呈逐渐升高的趋势。3.构建重组质粒pSOCS1 shRNA，并经酶切及测序鉴定；结果证实经酶切反应及测序证实重组质粒pSOCS1shRNA构建成功，其转染率为85﹪。

目录

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符号说明

前言

参考文献

第一部分SOCS1在内毒素血症及内毒素耐受小鼠肝组织中表达的变化

材料与方法

结果

小结

第二部分SOCS1在内毒素介导的Kupffer细胞激活及耐受中的表达变化

材料与方法

结果

小结

第三部分SOCS1特异性RNA干扰对RAW264.7细胞内毒素耐受性的影响

材料与方法

结果

小结

全文讨论

全文总结

参考文献

图片

文献综述细胞因子信号传导抑制因子(SOCS)的研究进展

致谢

攻读硕士学位期间发表的学术论文

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