人睫状神经因子类似物rh-CNTF(AR15)的重组制备、PEG修饰和生物学特性研究

摘要

蛋白质药物具有专一性强、时效高等优点，在临床治疗学中正得到越来越广泛的应用，但这类药物目前还存在着一些必须解决的问题，如给药系统不完善、定位给药困难，稳定性差、容易被酶类降解，因从循环系统中被快速清除导致体内半衰期短，生物利用率低等。针对这些问题，科学家基本遵循两种解决途径，第一是寻找一条蛋白质药物高生物利用度的给药途径；第二是通过化学修饰来优化蛋白质的代谢动力学特性，以延长其半衰期，达到长效稳定的目的。 化学修饰法是指在分子水平上对蛋白质进行改造，即在体外将蛋白质的侧链基团通过人工方法与一些化学基团，特别是具有生物相容性的大分子进行共价连接，从而改变蛋白质的性质。其主要优点是可以延长蛋白质在体内的半衰期，降低免疫原性和抗原性，另外还可以减弱蛋白酶的水解作用，增加蛋白分子的可溶性等。用于蛋白质修饰的大分子很多，常见的如聚乙二醇类，多糖类，同源蛋白质以及人工合成的多肽等。其中，聚乙二醇因其具有良好的生物相容性、反应简单、价格低廉等优点而受到较多的重视。 本研究希望通过对突变型人睫状神经因子rh-CNTF（A17R6315）的聚乙二醇修饰，获得低免疫原性、高稳定性的单聚PEG-rhCNTF（A17R6315），改善该蛋白药物的药代动力学以及给药便利程度。 本项目完成的工作和得到的结论包括以下方面： 1、完成了rh-CNTF（A17R6315）的重组纯化； 2、选择了合适的PEG修饰剂、优化PEG修饰条件并放大验证了PEG修饰工艺和纯化工艺； 3、建立了PEG修饰后纯化工艺、获得了单链PEG-rhCNTF目标产物； 4、探索了单聚PEG-rhCNTF（A17R6315）的初步特性； 5、分析比较了rh-CNTF（A17R6315）和PEG-rhCNTF（A17R6315）的免疫原性及药代动力学的差异，并对其药效作用进行对比研究。 以上工作为开发长效低免疫原性的PEG-rhCNTF药物奠定了基础

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英汉缩略语名词对照

声明

前言

第一部分rh-CNTF(A17R6315)的重组制备及分离纯化工艺研究

1材料

2方法

3结果

4讨论

5本章小结

参考文献

第二部分rh-CNTF(A17R6315)的聚乙二醇(PEG)修饰及分离纯化工艺研究

1材料

2方法

3结 果

4讨论

5本章小结

参考文献

第三部分rh-CNTF(A17R6315)与PEG-rhCNTF(A17R6315)的部分药理学特性改变研究

1材料

2方法

3结果

4讨论

5本章小结

参考文献

全文总结与展望

文献综述一 蛋白质药物PEG修饰的研究进展

文献综述二 睫状神经因子研究进展

致 谢

博士期间发表的论文及参与的科研课题