连续性血液滤过对多脏器功能衰竭患者血清诱导的血管内皮细胞凋亡及内质网应激的影响

摘要

目的：探讨连续性静脉静脉血液滤过（continuous veno-venoushemofiltration，CVVH）对多脏器功能衰竭（multiple organ dysfun-aionsyndrome，MODS）患者血清体外诱导的脐静脉内皮细胞凋亡及内质网应激的影响及其机制。
　　 方法：实验分为健康对照组、CVVH治疗前组、CVVH治疗6h组、CVVH治疗20h组，分别用10名健康志愿者的血清及10名MODS患者CVVH治疗前、治疗6h、治疗20h的血清体外诱导脐静脉内皮细胞（HUVEC）24h，TUNEL法检测HUVEC细胞凋亡率，免疫荧光观察细胞GRP78蛋白表达，RT-PCR检测细胞GRP78、CHOP、TNF-α、IL-6mRNA表达量，比色法检测健康志愿者及MODS患者CVVH治疗不同时间组血清中SOD活性、MDA含量。ELISA法检测检测健康志愿者及MODS患者CVVH治疗不同时间组血清中TNF-α、IL-6含量。
　　 结果：与健康对照组相比，CVVH治疗前组脐静脉内皮细胞凋亡率明显升高（p<0.01），细胞GRP78、CHOP、IL-6、TNF-αmRNA表达量也显著增高（p<0.01），免疫荧光显示脐静脉内皮细胞GRP78蛋白表达明显增多。与CVVH治疗前组比较，CVVH治疗6h组、20h组脐静脉内皮细胞凋亡率明显下降（p<0.01），细胞GRP78、CHOP、IL-6、TNF-αmRNA表达量明显减少（p<0.01），治疗20h组较治疗6h组进一步减少（p<0.01）。免疫荧光显示脐静脉内皮细胞GRP78蛋白表达治疗6h组较治疗前组明显减少，治疗20h组较治疗6h组进一步减少。与健康对照组比较，CVVH治疗前组患者血清SOD活性明显下降（p<0.01），MDA含量明显增高（p<0.01），血清中TNF-α、IL-6含量也明显增高（p<0.01）。经过CVVH治疗，MODS患者血清SOD活性明显升高（p<0.01），MDA含量明显下降（p<0.01），TNF-α、IL-6含量也明显下降（p<0.01）。
　　 结论：MODS患者血清体外诱导的HUVEC细胞凋亡与内质网应激有关，CVVH治疗能减轻氧化应激，清除炎症介质，减轻内质网应激程度，从而减少内皮细胞凋亡。