不同剂量标准化尘螨疫苗对哮喘小鼠Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞影响的研究

摘要

目的：通过建立粉尘螨过敏性哮喘小鼠的模型以及对哮喘小鼠用粉尘螨疫苗进行特异性免疫治疗,从小鼠的肺组织病理、细胞因子两方面反映粉尘螨疫苗治疗的情况,比较不同剂量的粉尘螨疫苗治疗对Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞表达的影响,从而寻求粉尘螨疫苗治疗的最佳维持剂量。
　　 方法：用粉尘螨提取液建立C57BL/6小鼠的过敏性哮喘模型后,将32只雌性小鼠随机分为4组治疗。生理盐水组采用粉尘螨提取液致敏激发+生理盐水治疗;低剂量组采用粉尘螨提取液致敏激发+低剂量粉尘螨提取液治疗;中剂量组采用粉尘螨提取液致敏激发+中剂量粉尘螨提取液治疗;高剂量组采用粉尘螨提取液致敏激发+高剂量粉尘螨提取液治疗。治疗完成后,采用流式细胞术检测小鼠脾细胞中CD4+CD25+T细胞及Foxp3+CD4+CD25+Tregs的含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测小鼠血清细胞因子IL-10、TGF-β1的水平。
　　 结果：⑴生理盐水组、低剂量组小鼠脾细胞中CD4+CD25+T细胞与CD4+T细胞含量的比例分别为[(7.49±0.72)％、(8.87±0.33)%]与中剂量组[(18.23±0.58)%]比较有统计学差异(P＜0.05),而中剂量组与高剂量组[(15.23±1.50)%]比较未见明显统计学差异(P＞0.05);生理盐水组、低剂量组Foxp3+CD4+CD25+Tregs与CD4+CD25+T细胞含量的比例分别为[(7.78±0.36)%、(8.71±0.46)%、]与中剂量组[(13.51±1.39)%]比较显著降低(P＜0.05),而中剂量组与高剂量组[(12.12±1.44)%]比较未见统计学差异(P＞0.05)。⑵生理盐水组、低剂量组小鼠血清IL-10的水平分别为[(48.14±0.38)ng/l、(50.01±0.93)ng/l]、TGF-β1的水平分别为[(72.41±1.65)ng/l、(74.67±1.66)ng/l]均低于中剂量组的水平分别为[(65.13±0.61)ng/l、(102.43±1.77)ng/1],有统计学差异(P＜0.05),而中剂量组虽然高于高剂量组,分别为[(63.91±0.27)nga、(100.11±1.26)ng/l],但未见明显的统计学差异(P＞0.05)。
　　 结论：①通过成功建立粉尘螨哮喘模型及完成不同剂量粉尘螨疫苗SIT发现,SIT可以上调哮喘小鼠Foxp3基因的表达、促进IL-10及TGF-β1的分泌。②通过粉尘螨疫苗剂量对Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞的数量及功能影响研究发现,粉尘螨疫苗剂量与Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞的数量和功能不是成正比的,显示中剂量粉尘螨疫苗对免疫治疗的调节作用最为显著,即中剂量为免疫治疗最佳维持剂量。