超声辐照LHRHa靶向微泡增强顺铂对卵巢癌移植瘤的抑制及凋亡诱导作用

摘要

第一部分人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤模型的建立
　　 目的:利用人卵巢癌耐药细胞株A2780/DDP建立裸鼠腹腔移植瘤模型,为人卵巢癌的进一步实验研究提供合适的动物模型。
　　 方法:将A2780/DDP细胞接种于10只裸小鼠的腹腔,定期测量裸鼠的体重与腹围,观察成瘤情况,待腹部出现可扪及的肿瘤形成物时随机处死4只荷瘤鼠,剖腹探查肿瘤形成情况,对肿瘤作病理组织学检查,记录其余6只荷瘤鼠的生存期及移植瘤种植情况。
　　 结果:裸鼠腹腔移植瘤形成率为100％;成瘤潜伏期为12～15d,生存期为35～40d;病理组织学显示移植瘤符合人浆液性卵巢癌的特点。
　　 结论;成功建立了人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤模型,移植瘤保持了原卵巢癌生物学特点,是研究人卵巢癌较理想的动物模型。
　　 第二部分超声辐照LHRHa靶向微泡增强顺铂对卵巢
　　 癌移植瘤生长抑制及凋亡诱导作用的实验研究
　　 目的:探讨超声辐照携带促黄体生成素释放激素类似物(LHRHa)的靶向微泡能否增强顺铂(DDP)对人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤的抑制及凋亡诱导作用。
　　 方法:利用LHRH受体阳性的人卵巢癌耐药细胞A2780/DDP建立裸鼠腹腔移植瘤模型。将30只荷瘤鼠随机分成6组,即DDP+靶向微泡+超声组(Ⅰ)、DDP+普通微泡+超声组(Ⅱ)、DDP组(Ⅲ)、靶向微泡+超声组(Ⅳ)、靶向微泡组(Ⅴ)和生理盐水对照组,Ⅰ～Ⅴ组为实验组。处理结束后记录肿瘤个数,剖取瘤块称质量,计算抑瘤率;对肿瘤及主要脏器进行病理组织学检查;透射电镜观察肿瘤细胞凋亡的形态学改变;免疫组化SP法检测肿瘤组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与细胞凋亡蛋白酶(caspase-3)的表达;TUNEL法原位检测肿瘤细胞凋亡情况,并计算凋亡指数(AI),反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定肿瘤组织内的。DDP含量。
　　 结果:各组的肿瘤个数、质量、AI、MMP-9和caspase-3表达均有差异(P＜0.01),其中,Ⅰ组的抑瘤率最大,肿瘤细胞凋亡最明显,其肿瘤个数、质量和MMP-9表达均显著低于其他4个实验组(P＜0.05)和对照组(P＜0.01),Al和caspase-3表达量均显著高于其他组(P＜0.01)。Ⅰ组肿瘤组织内的DDP含量最高,与Ⅱ、Ⅲ两组比较差异均有显著性(P＜0.05,P＜0.01)。
　　 结论:超声辐照LHRHa靶向微泡能显著增强DDP对卵巢癌移植瘤的抑制及凋亡诱导作用,其主要机制可能为通过增加细胞膜通透性,从而提高肿瘤组织内的药物聚积量。