超声微泡造影剂联合美金胺增强视神经损伤大鼠视网膜神经节细胞保护作用

摘要

目的：探讨超声微泡造影剂联合美金胺(memantine)，对由视神经钳夹造成损伤的大鼠视网膜神经节细胞(RGC)的保护作用。
　　方法：将40只SD雄性成年大鼠按随机分组法分为以下5个处理组：A组：正常对照组，B组：假手术组，C组：空白对照组，D组：玻璃体腔单独注射美金胺组，E组：玻璃体腔注射美金胺加超声微泡组，每组大鼠的数量均为8只，各组再按观察时间点的不同，随机分为：视神经损伤后第1周和第2周2个亚组，各亚组的大鼠数量均为4只。A组不做任何处理；B组只暴露视神经，不进行钳夹，玻璃体腔注射生理盐水，立即用超声波辐照大鼠眼球；C～E组建立视神经钳夹伤模型后，处理方式分别为C组玻璃体腔注射生理盐水，D组玻璃体腔注射美金胺，E组玻璃体腔注射超声微泡造影剂，再以相同方法玻璃体腔注射美金胺，之后立即用超声波辐照大鼠眼球。视神经钳夹后第1、第2周时，A～E组分别用荧光金(FG)逆行标记RGC并计数；闪光视觉诱发电位(F-VEP)检测，记录P100波潜伏期及振幅；荧光电子显微镜下观察视网膜细胞形态学改变。
　　结果：逆行荧光金(FG)标记RGC结果显示，各处理组视网膜定向铺片上均可见金黄色着染的RGC。A、B组间RGC数差异没有统计学意义(q=0.018，0.011；P=0.986，0.873)；C～E组RGC数均较A组减少，差异具有统计学意义(F=85.944，P=0.012)；D组RGC数多于C组，差异具有统计学意义(q=1.721，1.924；P=0.043，0.037)；E组RGC数明显高于C、D组，差异具有统计学意义(q=1.128，1.482，P=0.027，0.008；q=1.453，1.855，P=0.031，0.010)。F-VEP检测发现，A、B组间P100波潜伏期及振幅差异没有统计学意义(q=0.008，0.019，P=0.981，0.946；q=0.072，0.052，P=0.737，0.851)；C～E组P100波潜伏期较A组延长，振幅较A组降低，差异具有统计学意义(F=134.312，F=106.312，P=0.017，0.009)。荧光电子显微镜下观察发现，A、B组大鼠视网膜各层结构完整，排列整齐，RGC排列紧密整齐，细胞核均匀深染，胞核大小一致。C～E组大鼠的视网膜不同程度的水肿变厚，RGC有不同程度的排列紊乱，空泡化及细胞数目的减少。
　　结论：超声微泡造影剂联合美金胺能抑制视神经损伤后大鼠RGC的丢失，促进其视功能的恢复，对视神经损伤大鼠的RGC具有保护作用。