以氟维司群为载体的放射性碘对激素依赖性人乳腺癌治疗作用研究

摘要

目的：①对乳腺癌内分泌治疗药物氟维司群(Fulvestrant)进行放射性131I标记，探索一套高效的氟维司群放射性碘标记技术，同时证明碘化的氟维司群的理化性质未发生碘化以外的影响，生物学效能——即其与雌激素受体(estrogen receptor，ER)结合的能力未因标记了131I而改变。②明确碘化氟维司群在体外对人乳腺癌细胞的生长抑制作用的量效曲线，并确定适宜剂量。③探明碘化氟维司群对人乳腺癌裸鼠移植瘤的体内生长抑制作用，探索碘化氟维司群对乳腺癌的核素显像效果以及其对肝肾等重要脏器形态和功能的影响。 方法：第一部分采用改良氯胺T法对氟维司群进行放射性碘标记，纸层析进行标记率测定，柱层析进行分离纯化，质谱法检测其理化性质的变化，体外实验检测其生物学效能。第二部分以人乳腺癌MCF-7细胞（ER+）和MDA-MB-231细胞（ER-）为研究对象，经不同剂量碘化氟维司群作用后，采用MTT还原法、光镜、免疫组化、流式细胞术等检测方法检测碘化氟维司群对 MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞的生长抑制作用，明确碘化氟维司群对 MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞杀伤作用的不同。第三部分以通过前肢肩部皮下注射细胞悬液的方法建立的 MCF-7细胞裸鼠移植瘤动物模型为研究对象，采用静脉注射和瘤体局部注射碘化氟维司群两种给药方式，观察给药后裸鼠一般状况、肿瘤体积的变化、镜下肿瘤细胞坏死情况等，以判断碘化氟维司群在体内对MCF-7细胞的生长抑制作用；通过一般状况观察和形态学检查分析碘化氟维司群对裸鼠重要脏器功能和形态的影响；并探索碘化氟维司群对乳腺癌的核素成像作用。 结果：第一部分表明通过改良氯胺-T法，在ph值7.5、室温、反应时间5分钟及总反应体积500ul的条件下，能成功实现对氟维司群的放射性碘标记，纸层析、柱层析检测标记率达到60%，放化纯度达到95%，且具有良好的稳定性，同时保留了与MCF-7细胞结合的能力，并证明了MCF-7细胞具有摄取碘化氟维司群的能力，但对Na131I的摄取能力极低。第二部分检测了MCF-7细胞雌激素受体α的表达状况，表达率为30%，而MDA-MB-231细胞ER-α为阴性；体外的MTT实验结果表明相同放射剂量碘化氟维司群对MCF-7细胞和 MDA-MB-231细胞具有相似的细胞毒作用，且前者略强于后者，48小时的IC50值分别为35μCi、50μCi；流式细胞术检测结果与MTT实验结果具有相同的趋势。第三部分的研究成功建立了人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤动物模型，证实其能较好反应人乳腺浸润性癌的生物学特征，明确了正常裸鼠各器官ER-α分布情况；经尾静脉注射碘化氟维司群后，肿瘤部位有放射性浓聚，占到注射总量的4.33%，肿瘤体积先缩小后逐步增大；血液中的放射性占到注射总量的20.76%；肝肾等脏器也有放射性分布，其分布符合雌激素受体分布状况；尾静脉注射后核素显像表明尽管肿瘤可以显像，但会受到血液和主要脏器内放射性干扰；瘤体局部注射显示强大的肿瘤杀伤作用，放射性分布基本局限于瘤体区域。 结论：建立了碘化氟维司群从合成到分离纯化的整套技术，可为实现131I治疗乳腺癌提供良好的载体。体外实验表明碘化氟维司群对乳腺癌MCF-7细胞有良好的生长抑制作用，且是放射治疗作用和内分泌治疗作用的叠加。体内实验均表明碘化氟维司群对MCF-7细胞有确切生长抑制效应，且对裸鼠的一般状况及重要脏器形态和功能的影响是可控的；尾静脉注射碘化氟维司群对肿瘤的核素显像效果欠理想，靶向性有待进一步提高，改进给药方式增强其靶向性是未来深入研究该课题的核心问题。局部注射碘化氟维司群对肿瘤的杀伤作用强于尾静脉注射，可导致瘤体大面积坏死，且无核素全身扩散表现，可考虑用于临床降低乳腺癌分期。

目录

英汉缩略语名词对照

前 言

第一部分：碘化氟维司群的合成与鉴定

1 实验材料及方法

2 实验结果

3 讨论

第二部分 碘化氟维司群对人乳腺癌MCF-7细胞放射治疗作用的体外实验

1 实验材料及方法

2 实验结果

3 讨论

第三部分 碘化氟维司群对人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤的体内生长抑制作用

1 实验材料及方法

2 结果

3 讨论

全文总结

参考文献

文献综述:放射性碘标记技术及其靶向放疗作用研究进展

致谢

攻读博士学位期间完成的论文