MAPK负调控因子MKP-1在APP/PS1双转基因小鼠脑内的分布及表达

摘要

目的：研究丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1（Mitogen-activated protein kinase phosphatase-1, MKP-1）在不同月龄段APP/PS1双转基因阿尔茨海默病（Alzheimer's Disease, AD）模型小鼠及其同窝野生型小鼠脑内的分布及表达差异，以探讨MKP-1在AD病理发生发展过程中所起的作用。
　　方法：选择3月、8月和12月龄的APP/PS1双转基因小鼠及其同月龄段的野生型小鼠作对比，运用免疫组化观察AD模型小鼠及其同窝野生型小鼠脑内MKP-1的分布及表达；免疫荧光检测MKP-1在不同年龄段AD模型小鼠脑内的变化；Western Blot检测MKP-1、脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERK)、p-ERK、c-Jun氨基端激酶（c-JUN N-terminal kinases,JNK）、p-JNK、P38激酶同工酶（P38 kinases,p38）及p-p38的变化；Real Time-PCR检测MKP-1和BDNF的mRNA的变化，激光共聚焦检测MKP-1和4G8、p-ERK和4G8、p-JNK和4G8、p-p38和4G8共表达情况。
　　结果：1.形态学结果：1）MKP-1在APP/PS1双转基因小鼠脑内广泛分布，包括大脑皮质、海马、纹状体、嗅球和小脑等；MKP-1免疫阳性细胞在APP/PS1双转基因小鼠脑内的数量明显低于同月龄的正常对照组（P<0.05），且随着APP/PS1双转基因小鼠月龄的增加，MKP-1免疫阳性细胞的数量逐渐降低；实验还发现，MKP-1免疫阳性物形成类似老年斑的斑块；免疫荧光双标结果显示，与4G8阳性斑块（此即老年斑）相比，MKP-1阳性斑块的数量远远低于4G8阳性斑块的数量，但是MKP-1只能表达出部分老年斑，随着APP/PS1双转基因小鼠月龄的增加，表达的老年斑数目也逐渐增加。
　　2.Western blot结果：随着APP/PS1双转基因小鼠月龄的增加， MKP-1（P<0.05）和BDNF（P<0.05）的蛋白表达明显减弱，JNK（P>0.05）、ERK（P>0.05）和P38（P>0.05）的变化无统计学差异而p-JNK（P<0.05）、p-ERK（P<0.05）和p-P38（P<0.05）则蛋白表达明显上调。
　　结论：MKP-1在APP/PS1双转基因不同年龄段小鼠脑内及与其同窝野生型小鼠脑内MKP-1的表达存在差异，而且可以表达部分老年斑可能和Aβ的产生和AD的发病机制相关。

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英汉缩略语名词对照

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英文摘要

前言

1材料和方法

1.1实验动物

1.2主要实验仪器、药品和试剂

1.3实验方法

2 实验结果

2.1 MAPK在不同月龄段痴呆小鼠脑内的分布与表达

2.2 MKP-1在痴呆小鼠和同月龄野生型小鼠脑内的分布及表达比较

2.3 MKP-1在不同月龄段APP/PS1双转基因小鼠脑内的表达变化

2.4 MKP-1与老年斑的关系

2.5 MAPK与老年斑的关系

2.6脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）在不同月龄段APP/PS1双转基因小鼠脑内的表达变化

3讨论

3.1 关于AD的发病机制

3.2丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）与AD的关系

3.3 MAPK负调控因子MKP-1对AD的保护作用

全文总结

参考文献

文献综述: MKP-1的研究进展

致谢

攻读硕士期间发表的论文