纳米级产气脂质体增效HIFU治疗作用的研究

摘要

第一部分纳米级产气脂质体的制备、体外产气及稳定性研究 目的： 选用磷脂作为外壳，碳酸氢铵溶液作为内核，制备包裹碳酸氢铵溶液的纳米级脂质体（Liposomes Containing ammonium bicarbonate，Lip-ABC），并研究其基本特征、产气性能以及体内外稳定性。 方法： 本部分研究分为两节。在第一节中采用薄膜水化法+挤出法制备Lip-ABC乳液，并对其粒径、电位等性质进行表征，然后研究其在高强度聚焦超声（HIFU）触发下产气的性质。第二节通过体外HIFU触发产气研究Lip-ABC的体外稳定性，通过体内光声显像研究其体内稳定性。 结果： 第一节通过薄膜水化法+挤出法成功制备出 Lip-ABC，其粒径为173.2±71.46nm，表面电位为-23.2±4.88mV。通过HIFU触发后，灰度差值增加，显著高于对照组，说明Lip-ABC可在HIFU触发下产气。第二节通过体外HIFU触发产气研究Lip-ABC的体外稳定性，结果在体外温度37℃条件下，Lip-ABC至少可稳定6小时以上。通过体内光声显像研究其体内稳定性，结果Lip-ABC在体内至少能稳定存在6小时以上。 结论： 通过比较简单的工艺制备出Lip-ABC乳液，其粒径小且均一性好，具备在HIFU触发下产气的性质，同时其体内外稳定性较好，为下一步实验奠定了基础。 第二部分碳酸氢铵溶液、纳米级产气脂质体增效HIFU消融离体牛肝的研究 目的： 通过研究碳酸氢铵溶液增效HIFU消融离体牛肝的作用并摸索恰当的参数，然后以此参数研究Lip-ABC乳液增效HIFU消融离体牛肝的作用。 方法： 本部分研究分为两部分进行。在第一节中用HIFU以不同功率和时间消融离体牛肝，比较不同浓度的碳酸氢铵溶液的实验组与注射 PBS的对照组在灰度差值、灰度区域面积及凝固性坏死体积的差别，考察碳酸氢铵溶液体外增效 HIFU的效果以及摸索恰当的增效功率和时间参数。第二节用 HIFU以第一节摸索出的参数消融离体牛肝，比较Lip-ABC乳液实验组和PBS溶液对照组及包PBS溶液的Lip-PBS乳液对照组在灰度差值、灰度区域面积及解剖坏死体积的差别，考察Lip-ABC乳液体外增效HIFU的作用。 结果： 在第一节中，在灰度差值方面，（210w5s，0.025g/ml）、（210w5s，0.05g/ml）、（210w5s，0.1g/ml）及（210w5s，0.2g/ml）等组与相应PBS对照组无显著差异（P＞0.05），其余各组均显著高于PBS对照组（P＜0.05）。在灰度区域面积方面，仅（120w3s，0.025g/ml）、（120w3s，0.05g/ml）、（120w3s，0.1g/ml）、（120w5s，0.025g/ml）、（120w5s，0.05g/ml）、（120w5s，0.1g/ml）、（180w5s，0.1g/ml）、（180w5s，0.2g/ml）、（210w5s，0.025g/ml）、（210w5s，0.05g/ml）、（210w5s，0.1g/ml）及（210w5s，0.2g/ml）等组与相应PBS对照组无显著差异（P＞0.05），其余各组均显著大于相应 PBS对照组（P＜0.05）。在凝固性坏死体积方面，（120w3s，0.025g/ml）、（120w3s，0.05g/ml）、（120w3s，0.1g/ml）、（120w5s，0.025g/ml）、（120w5s，0.05g/ml）、（120w5s，0.1g/ml）等组未见凝固性坏死；（180w5s，0.2g/ml）及（210w5s，0.05g/ml）两组与相应PBS对照组无显著差异（P＞0.05）；（210w5s，0.1g/ml）及（210w5s，0.2g/ml）两组显著低于相应PBS对照组；其余各组均显著大于相应PBS对照组（P＜0.05）。在第二节中，无论是HIFU（150w3s）还是HIFU（150w5s），Lip-ABC组在灰度差值、灰度面积及凝固性坏死体积方面均显著高于Lip-PBS对照组和PBS对照组（P＜0.05）；Lip-PBS对照组和 PBS对照组的灰度差值、灰度面积以及凝固性坏死体积均无明显差异（P＞0.05）。 结论： 通过对碳酸氢铵溶液及Lip-ABC乳液增效HIFU消融离体牛肝的研究，可得出在HIFU功率为150w时，Lip-ABC乳液具有良好的增效HIFU消融离体牛肝的作用，为下一步体内实验奠定了基础。 第三部分纳米级产气脂质体增效HIFU治疗裸鼠种植乳腺癌的研究 目的： 研究Lip-ABC乳液经静脉注射后，在体内增效HIFU消融肿瘤的作用，并观察其体内应用的安全性。 方法： 首先建立裸鼠种植乳腺癌模型，分为实验组和对照组，在HIFU治疗前实验组通过尾静脉注射Lip-ABC乳液，对照组注射Lip-PBS乳液。HIFU治疗后分不同时间段比较两组治疗效果差异（灰度差值、灰度区域面积、凝固性坏死体积及超微结构差异等）。实验过程注意观察裸鼠存活情况。 结果： 无论灰度差值、灰度区域面积、凝固性坏死体积还是非靶区肿瘤组织凋亡指数，实验组均显著高于对照组（P＜0.05）；而 PCNA表达率则是实验组显著低于对照组（P＜0.05）。两组裸鼠HIFU治疗后均正常存活，觅食及饮水等。 结论： Lip-ABC乳液具有良好的体内增效HIFU消融肿瘤的作用，且安全性好，值得进一步研究。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

参考文献

第一部分 纳米级产气脂质体的制备、体外产气及稳定性的研究

前言

第一节 纳米级产气脂质体的制备、表征及体外产气研究

1材料与方法

2 结 果

3 讨 论

参考文献

附图

第二节 纳米级产气脂质体体外及体内稳定性研究

1材料与方法

2 结 果

3 讨 论

参考文献

附图

第二部分 碳酸氢铵溶液、纳米级产气脂质体增效HIFU消融离体牛肝的研究

前言

第一节 碳酸氢铵溶液增效HIFU消融离体牛肝的研究

1 材料与方法

2 结 果

3 讨 论

参考文献

附图

第二节 纳米级产气脂质体增效HIFU消融离体牛肝实验

1 材料和方法

2结 果

3 讨 论

参考文献

附图

第三部分 纳米级产气脂质体增效HIFU治疗裸鼠种植乳腺癌的研究

前言

1 材料和方法

2 结 果

3 讨 论

参考文献

附图

全文总结

本课题的创新性：

本课题的不足之处：

本课题后续工作展望：

文献综述:HIFU治疗肿瘤的若干问题及对策

致谢

攻读博士学位期间发表的学术论文、参研项目、会议交流情况