低氧预处理尿源性干细胞与复合透明质酸胶在促进膀胱组织再生中的协同作用

摘要

目的: 探讨低氧（3%O2）预处理尿源性干细胞（rabbit urine-derived stem cells;rUSCs）与复合透明质酸胶在促进膀胱组织再生的协同作用。 方法: 收集42只健康、雄性兔尿液以及膀胱冲洗液;分离、培养并鉴定rUSCs;低氧处理rUSCs后检测其增值、分泌、凋亡等变化;诱导rUSCs体外向平滑肌、尿路移行上皮方向诱导分化;全层切除兔膀胱40%面积;用等面积经3%过氧乙酸（peracetic acid;PAA）处理过的新鲜猪小肠（porcine small intestines;SIS）修补;自体rUSC、SMC;或rUSC分化后的SMC与复合透明质酸胶（hyaluronic acid-heparin gel; HA gel）混匀后;均匀平铺覆盖于SIS之上;单纯HA gel+SIS作为对照;细胞荧光染料PKH-67标记rUSC;4周后观察其体内存活、分布及分化情况并做再生膀胱功能及组织学检测。 结果: 原代培养约第6～7天可观察到单个、体小、“米粒样”rUSCs克隆形成. rUSCs在体外能够高效地分化为尿路移行上皮细胞及平滑肌细胞;4周后尿流动力学结果显示实验组再生膀胱之容量、顺应性较对照组;均有大幅度提高;同常氧培养条件相比;rUSCs在低氧条件下能获得明显更多的细胞克隆;且其增值能力;旁分泌功能等明显优于常氧条件下的rUSCs;而凋亡现象减弱;低氧rUSC组PKH-67标记细胞存活率明显高于常氧rUSC组;组织学检测提示实验组上皮组织、平滑肌肌束再生等亦好于对照组;且低氧组再生效果相对于常氧组显著提高。 结论:1）3%O2低氧条件培养;能够提高rUSCs增殖、分泌功能;而抑制其早期凋亡的发生;2）低氧预处理能增加rUSCs在体内的存活率;从而促进兔膀胱肌肉组织的再生;3）透明质酸胶与rUSCs合用;有效地增加了移植膀胱组织的再生。

目录

第一个书签之前