外源性表皮生长因子对内毒素型急性肺损伤家兔肺水转运的研究

摘要

急性肺损伤(ALI)是常见的呼吸系统急危重症，是由心源性以外的各种肺内外致病因素导致的急性、进行性缺氧性呼吸衰竭。临床及实验研究发现ALI主要病理改变为炎症反应导致肺毛细血管内皮和肺泡上皮损伤，肺微血管内皮细胞肿胀、结构破坏、发生凋亡或坏死，由中性粒细胞为主介导的肺脏局部炎症反应致肺毛细血管通透性增高性肺水肿，肺泡液渗出，形成富含蛋白质的肺水肿及透明膜形成，并伴有肺间质纤维化。ALI发病机制错综复杂，迄今尚未充分阐明，而且多数病例常于发病数天内死亡。因此，对ALI的诊治至今仍然是一个挑战。 目前，ALI的治疗除了通过机械通气外。现有的药物治疗还有：NO吸入、糖皮质激素、山莨菪碱(654-2)和其它血管扩张剂，治疗机制主要是抑制细胞因子、脂质炎性介质、细胞粘附分子等多种炎性介质的产生以及清除自由基减轻脂质过氧化对ALI发挥治疗作用，降低肺微血管阻力及毛细血管通透性，改善微循环，减轻微循环障碍引起的肺损伤。以上方法虽然在治疗ALI方面取得了很大进步，尤其对早期ALI疗效较明显，而对严重的ALI仍无明显的改善作用。由于其导致急性呼吸衰竭和多器官功能衰竭的机制尚不完全清楚，病死率还很高，治疗策略仍在不断完善和探索中。 近年来，利用生物学方法防治ALI越来越受到重视，其中表皮生长因子(EFG)，国内外已在动物模型中进行研究，实验研究证实外源性EFG对ALI大鼠肺泡Ⅱ型细胞能显著增殖数量，提示外源性EFG具有较好的保护肺泡上皮功能，从而减轻肺损伤。但EFG对肺毛血管内皮功能及减少渗出，对肺水转运的研究较少报道。肺血管内皮功能在急性肺损伤(ALI)的发病及治疗中均占重要地位，EFG能刺激血管内皮细胞的移行和增殖，刺激内皮细胞合成DNA。对肺血管起修复作用，减少肺水肿的产生，从而提高ALI的逆转、改善作用。从理论上分析，具有较好的研究和应用前景。为了证明这一设想，并研究这种作用的分子病理学特征，本课题拟通过利用外源性表皮生长因对内毒素型急性肺损伤家兔肺水转运的研究，分析EGF对ALI血管内皮细胞的增殖及对其通透性一肺水转运的影响作用。 研究目的: 本实验通过利用外源性表皮生长因对内毒素型急性肺损伤家兔肺水转运的研究，评价EGF对ALI血管内皮细胞的增殖及对其通透性的影响作用。 对象与方法: 1．动物：家兔32只，体重1.90-2.50千克，平均2.0±0.35千克。由广州医学院动物实验中心提供。 2．分组：按随机方法分为4组(每组8只)：①正常对照组；②单纯急性肺损伤组；③EGF对照组(单纯给EGF)；④EGF治疗组(急性肺损伤+EGF治疗)。 3．动物模型制作方法：经耳缘静脉注入内毒素LSP(脂多糖)制备成急性肺损伤的动物模型。 4．EGF治疗：在家兔内毒素致急性肺损伤后立即进行EGF治疗。具体方法为：将兔固定，1ml注射器吸取EGF 100μg/kg，加生理盐水稀释至1ml，将特制针头经家兔声门插入气管，迅速把液体以雾状喷入，回笼饲养。 5．观察内容及指标：各组于1、12、24、48小时分批检测动脉血氧变化，用ELISA法测定血清TNF-a、IL-6水平；处死动物，分离肺组织，观察病理形态变化；取右肺组织称重，后烘干48小时致恒重，计算肺组织湿重/干重(W/D)比值。 6．统计学方法：使用SPSS13.0 for Windows统计软件进行分析。所有实验数据以均数±标准差(X±s)表示，组间差异比较用方差齐性检验(Levene法)，样本均数之间的两两比较用q检验。两组均数间用非配对t检验。 结论: 1．TNF-a、IL-6参与和反映了急性肺损伤的病理生理发生发展过程。 2．外源性表皮生长因子能减少肺毛血管的渗出，改善肺水转运，连续48小时观察证实对急性肺损伤的具有一定的修复保护作用。

目录

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

附图

综述 生物学方法治疗急性肺损伤研究进展

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致谢