雌性及雄性小鼠肝脏再生能力比较

摘要

实验背景与目的:肝脏是具有有强大再生修复能力的器官，但临床统计资料显示男性肝硬化、肝癌发病率远远高于女性；多种其它因素诱发的肝病也主要发生于男性，其机制不明。我们的前期实验发现同样的生存环境和实验条件下，雄性鼠对损伤的耐受性大不如雌性，提示不同性别小鼠在肝脏发生病变后的自身修复过程可能存在着差别，而阐明这一差异的内在机制对临床上肝病患者的个体化治疗有着极为重要的意义。
　　 动物实验发现当单纯肝脏大部切除后，余肝组织的成熟肝细胞迅速代偿增殖，很快就能恢复原来的肝重及肝功能，然而成熟肝细胞增殖能力被抑制后，就会激活肝脏干细胞—卵圆细胞，使其增殖分化转变为肝细胞和胆管上皮细胞。2-乙酰氨基芴(2-AAF)可抑制成熟肝细胞的增殖，2-AAF联合肝大部分切除手术是一种刺激卵圆细胞增殖的经典模型。本研究通过建立不同性别小鼠肝大部分切除模型（PH模型）和2-AAF联合肝大部分切除模型（2-AAF+PH模型），研究不同性别小鼠术后各时间点成熟肝细胞和卵圆细胞的再生情况，比较肝再生能力是否存在差别，以探讨肝再生修复与性别之间的关系。
　　 方法: 120只昆明小鼠(不同性别各半)，随机分为两组：PH组和2-AAF+PH组。PH组小鼠切除2/3肝脏，2-AAF+PH组小鼠先灌胃2-AAF 5d后再行PH，两组小鼠分别于术后1d、3d、5d、7d、10d、14d取肝组织，秤量术前、术后体重及肝重，计算肝再生率；根据肝再生率、BrdU标记率以及PAS染色来评估和比较两种模型中不同性别小鼠肝脏的再生能力。
　　 结果:
　　 1、两种模型不同性别小鼠肝再生率的比较：PH组小鼠术后各时间点不同性别之间差异均无显著性意义(P>0.05)；2AAF+PH组术后第7d和第10d雌性小鼠肝再生率高于雄性小鼠（P<0.05），其余各时间点差异无显著性意义(P>0.05)。
　　 2、两种模型不同性别小鼠BrdU标记指数比较：PH组BrdU阳性标记指数差异均无显著性意义(P>0.05)；2-AAF+PH组肝非实质细胞术后各时间点BrdU阳性标记指数除第7d、14d外,其余时间均有差异，以第1d、3d、5d雄性高于雌性（P<0.01）,第10d雌高于雄（P<0.01）；肝实质细胞BrdU阳性标记指数在术后各时间点均有差异，雌性高于雄性（P<0.01）；BrdU阳性细胞团于术后第3d、5d及7d有明显区别,雌性高于雄性（P<0.05）。
　　 3、两种模型不同性别小鼠PAS染色相对分值比较：PH组除术后第7d外，其余各时间点均有显著性差异，其中术后1d和14d雄性高于雌性（P<0.01），3d、5d、10d雌性高于雄性（P<0.01）；2-AAF+PH组术后各时间点雌性小鼠PAS染色相对分值均高于雄性（P<0.05）。
　　 结论:
　　 1、成功构建了小鼠肝大部切除改良模型。
　　 2、单纯肝大部切除术后各时间点不同性别小鼠肝再生能力无明显差异；雌性及雄性鼠均于术后7d-10d完成肝的再生修复。
　　 3、给予2-AAF抑制肝细胞增殖之后再行肝大部切除术，增殖细胞主要来源于肝卵圆细胞及其他非实质细胞，雄性鼠较早出现增殖反应，但其再生修复持续时间比雌性鼠长，提示在同样条件下雄性鼠对外界刺激更为敏感，但其再生修复能力比雌性鼠弱。
　　 4、肝再生修复过程中雌性鼠肝糖原合成能力比雄性鼠强。