鲫鱼肌肉中阿维菌素类残留检测和消除规律研究

摘要

阿维菌素(AVM)和伊维菌素(IVM)是两种大环内酯类抗寄生虫药，在我国畜禽和水产养殖上已获广泛应用。为了监测鲫鱼肌肉(包括皮)中AVM和IVM残留情况，以及为制定合理的休药期提供科学依据，本文建立了鲫鱼肌肉(包括皮)中AVM和IVM高效液相色谱-荧光(HPLC-FLD)多残留检测方法，分别研究了AVM和IVM在鲫鱼肌肉(包括皮)中的残留消除规律，并对重庆市部分地区的鲫鱼进行了肌肉(包括皮)中AVM和IVM的残留检测。 鲫鱼肌肉(包括皮)中AVM和IVM多残留检测的方法学研究：样品用乙腈提取，正己烷脱脂净化，多拉菌素作内标，经1-甲基咪唑和三氟乙酸酐的乙腈溶液在室温下避光衍生化并在甲醇中水解后，进行HPL-FLD检测分析。色谱条件为，流动相：甲醇/水(94/6，v：v)；流速：1.0mL/min；，检测波长：激发波长365nm，发射波长475nm；柱温：35℃；进样量：20μL。结果，AVM和IVM在5～100ng/g范围内具有良好线性，R2均为0.9998；检测限分别为0.8ng/g和1 ng/g，定量限分别为2.7 ng/g和3.4 ng/g；AVM和IVM的提取回收率分别为92.15％～104.53％和91.32％～103.03％；方法回收率分别为90.50％～104.54％和94.08％～106.38％：日内和日间变异系数分别小于9.29％、7.74％和5.84％、6.71％。该方法高效、灵敏、简便，其灵敏度、回收率和重现性等符合有关兽药残留检测要求，可用于鲫鱼肌肉中AVM和IVM的多残留检测。 AVM和IVM在鲫鱼肌肉中的残留消除规律研究：试验模拟水产养殖实际，在27～31℃的自然水温中，分两个试验进行，每个试验的试验组饲养45 g左右的健康鲫鱼100尾，50尾作对照组。试验一，在鱼缸中单次泼洒AVM乙醇溶液，使水体中AVM浓度为1.32 ng/mL；试验二组，在鱼缸中单次泼洒IVM乙醇溶液，使水体中IVM浓度为1.23 ng/mnL。对照组不添加药物。给药后0、1、3、5、8、10、11、14、16、21、25、28、32和35 d取样，采集鲫鱼肌肉(包括皮)样品，用本研究所建立的方法分别检测鲫鱼肌肉(包括皮)中AVM和IVM残留量。结果，给药后0 d(给药后4和5 h即为零休药期)，鲫鱼肌肉(包括皮)中AVM含量为13.68±4.68 ng/g，IVM含量为8.1±1.67 ng/g；AVM和IVM残留浓度均在给药后第3 d达到峰值，分别为36.38±6.20 ng/g和25.47+3.16 ng/g；AVM残留浓度约在给药后第10 d降至一半，IVM约在给药后第11 d天降至一半：鲫鱼肌肉(包括皮)中AVM在给药后第32 d未检出，WM在给药后第28 d未检出。鲫鱼肌肉(包括皮)中AVM的药动学主要参数分别为：峰残留量(Cmax)为31.42 ng/g，达峰时间(Tmax)为3.53 d，曲线下面积(AUC)为469.88d．ng/g，消除半衰期(t2/2)为7.48 d。消除曲线方程：LnC=-0.0922t+3.8985，用此方程计算消除半衰期t1/2e为7.52 d。鲫鱼肌肉(包括皮)中IVM的药动学主要参数分别为：Cmax为24.51ng/g，Tmax为3.91 d，AUC为293.13d ng/g，t1/2k为4.42d。消除曲线方程：LnC=-0.1382t+3.9202，用此方程计算消除半衰期t1/2e为5.01 d。结果表明：鲫鱼对水中的这两种药物中吸收快，蓄积浓度不高，滞留时间较长，消除较为缓慢。目前，国内外尚无AVM和IVM在鲫鱼体内的MRL(最高残留限量)及休药期(WDT)规定，本研究分别参照欧盟(EC)和中国农业部法规中规定的AVM(标记残留物AVM B1a)在羊肌肉的MRL20μg/kg和25 μg/kg，通过WDT公式计算，AVM对于鲫鱼的WDT理论上分别为9.79 d和7.37 d；通过WT1.4软件分析，WDT分别为14.97 d和12.64 d，考虑理论与实际的差别，建议延长至19 d；参照欧盟(EC)和中国农业部法规规定的WM(标记残留物IVM H2B1a)在羊肌肉的MRL20 μg/kg，通过WDT公式计算，IVM对于鲫鱼的WDT理论上为6.69 d；通过WT1.4软件分析，WDT为11.04 d，考虑理论与实际的差别，建议延长至16 d。重庆市部分地区鲫鱼肌肉中AVM和IVM的残留检测：两种药物的阳性检出率均低于5％，并且残留量均低于10 ng/g。检测情况表明，这些地区的水产养殖在使用AVM和IVM方面较为规范，所检测地区的鲫鱼AVM和IVM残留量符合国家要求，市民可放心购买食用。

目录

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声明

第1章文献综述

1.1阿维菌素类药物概述

1.2动物性食品中药物残留的现状

1.3药物残留的危害

1.4 AVMs在动物性食品中的残留检测研究概况

1.5 AVM和IVM在动物体内的药动学和消除规律研究

第2章引言

第3章鲫鱼肌肉中阿维菌素与伊维菌素多残留检测的方法学研究

3.1试验材料

3.2试验方法

3.3结果

3.4讨论

3.5结论

第4章阿维菌素在鲫鱼肌肉中的残留消除规律研究

4.1试验材料

4.2试验方法

4.3试验结果

4.4讨论

4.5结论

第5章伊维菌素在鲫鱼肌肉中的残留消除规律研究

5.1试验材料

5.2试验方法

5.3试验结果

5.4讨论

5.5结论

第6章重庆市部分地区鲫鱼肌肉中AVM和IVM的残留检测

6.1材料

6.2方法

6.3结果

6.4讨论

6.5结论

第7章总结

参考文献

致谢