荷正电聚合物为探针共振光散射光谱法检测生物大分子

摘要

本文主要研究内容如下： 1．研究了聚合物与蛋白质的相互作用，优化出最佳反应条件，通过计算得到了蛋白质与聚合物的结合比、结合常数等数据，建立了一种测定蛋白质的新方法。在pH值为7.54的B—R缓冲介质中，体系在470nm处产生最大的共振光散射信号，在最佳实验条件下反应体系增加的RLS值与BSA和HSA分别在3.5x10-9-2.1×10-7M和3.3×10-9-1.7×10-7M范围内成线性，检出限分别为1.2×10-9 M和1.2×10-9M。并利用此方法对蛋白合成样进行了测定，测定结果令人满意。 2．研究了聚合物与小牛胸腺DNA的相互作用，优化出最佳反应条件，通过计算得到了DNA与聚合物的结合比、结合常数等数据，建立了一种测定DNA的新方法。在pH值为7.0的PBS缓冲、离子强度为0.0300M的介质中，体系在344.8nm处产生最大的共振光散射信号，在反应的最佳条件下反应体系增加的RLS与小牛胸腺DNA的浓度在0.0900至2.70μg/mL范围内成线性，检出限为17ng/mL。 3．将聚合物用于DNA杂交的检测当中，基于聚合物与单链DNA和双链DNA反应前后RLS信号的不同，实现了完全互补序列与单碱基错配序列及非互补碱基序列的区分，建立了一种简单、快速、免标记的DNA杂交检测方法。在pH值为7.0，离子强度为0.030M的PBS缓冲介质中，在470nm处产生最大的共振光散射信号，在最佳条件下，靶物DNA在5.0-500nM的浓度范围内线性良好，检测限约为2nM。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩写符号对照表

声明

第1章 综述

1.1共振光散射光谱法简介

1.1.1光散射现象

1.1.2共振光散射光谱法简介

1.1.3共振光散射技术在生物大分子分析中的应用

1.2共振光散射光谱法应用于蛋白定量检测

1.2.1蛋白的常用检测方法

1.2.2共振光散射光谱法检测蛋白简介

1.3共振光散射光谱法检测核酸

1.3.1核酸的常用检测方法

1.3.2共振光散射应用于核酸定量检测

1.3.3共振光散射用于DNA杂交的检测

1.4本文的主要研究内容

第2章荷正电聚合物为探针共振光散射光谱法检测蛋白质

2.1引言

2.2实验部分

2.2.1仪器与试剂

2.2.2实验方法

2.3结果与讨论

2.3.1反应的光谱特性

2.3.2反应条件的优化

2.3.3反应体系的线性优化及合成样的测定

2.3.4结合常数与结合比的测定

2.4结论与展望

第3章荷正电聚合物为探针共振光散射光谱法检测DNA

3.1引言

3.2实验部分

3.2.1仪器与试剂

3.2.2实验方法

3.3结果与讨论

3.3.1反应的光谱特性

3.3.2反应条件的优化

3.3.3测定DNA的线性

3.3.4结合比与结合常数的计算

3.4结论与展望

第4章 基于荷正电聚合物探针的共振光散射法DNA杂交检测

4.1引言

4.2实验部分

4.2.1仪器与试剂

4.2.2实验方法

4.3结果与讨论

4.3.1杂交反应的光谱表征

4.3.2反应条件的优化

4.3.3反应的线性曲线

4.3.4检测碱基错配情况

4.4实验结论

参考文献

硕士期间研究成果

致谢