RNAi介导survivin基因沉默对胰腺癌细胞株Panc-1增殖、凋亡及化疗敏感性的影响

摘要

【目的】 应用RNAi技术靶向封闭人胰腺癌细胞株Panc-1 survivin基因，观察封闭该基因对胰腺癌细胞的增殖、凋亡及其化疗敏感性的影响，探讨survivin在胰腺癌的发牛、发展中的作用，为胰腺癌的基因治疗提供新的线索。 【方法】 应用脂质体基因转染技术将survivin--siRNA转染Panc-1细胞，用MTT法检测细胞增殖的情况，用RT—PCR和免疫组化方法分别检测survivin mRNA及蛋白的表达，流式细胞仪检测细胞凋亡。 【结果】 Survivin特异的siRNA明显抑制Panc-1细胞中survivin mRNA及蛋白的表达，与对照组比较其抑制率分别为72.7％、73.42％。转染survivin-siRNA(100nM)48小时后对Panc-1细胞增殖、凋亡均无明显影响(p>0.05)，转染survivin siRNA与化疗药物5-氟尿嘧啶(5-FU)联用对Panc-1细胞化疗敏感性无明显影响(P>0.05)。 【结论】 应用RNAi技术将survivin—siRNA转染胰腺癌细胞(PaJlc-1)，能成功介导survivin基因的沉默，达到靶向封闭人胰腺癌细胞株survivin基因目的。抑制survivin的表达对Panc-1细胞的增殖、凋亡及化疗敏感性无明显影响。提示survivin在胰腺癌Panc-1细胞的增殖、凋亡调控及提高化疗敏感性中所起的作用可能并非关键性的，survivin-siRNA在胰腺癌基因治疗中的作用尚需进一步探讨。

目录

声明

前言

1.1研究背景

1.2研究目的

1.3研究内容

材料与方法

2.1实验材料

2.2实验方法

2.3统计学处理

实验结果

讨论

小结

参考文献

综述　凋亡抑制蛋白Survivin与胰腺癌

致谢

附录