荣昌猪BPI基因型对其免疫指标及抗病能力的影响

摘要

杀菌/通透性增强蛋白(bactericidal/permeability-increasing protein，BPI)具有对革兰氏阴性菌广泛的杀菌活性及中和内毒素或脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)活性，在动物机体天然防御中发挥重要作用。研究证实，猪BPI基因外显子3和外显子4存在多态性，BPI杀菌活性和中和内毒素活性的区域位于外显子3区段，而猪BPI基因外显子4多态性和沙门氏菌的易感性有关。
　　 本研究以饲养在相同条件下的81头荣昌猪为试验动物，利用PCR-SSCP检测荣昌猪BPI基因外显子3和外显子4多态性，测定其60日龄的血常规(白细胞总数、淋巴细胞比率、中间细胞比率、粒细胞比率、淋巴细胞数、中间细胞数、粒细胞数、红细胞总数、血红蛋白、红细胞压积、红细胞平均体积、血红蛋白含量、血红蛋白浓度、红细胞分布宽度、红细胞分布宽度、血小板总数、血小板平均体积、血小板分布宽度、血小板压积、血小板大细胞比率)和IgG；从BPI基因外显子3和外显子4的每种组合基因型(共5种)中，随机选择5头(共25头)，在70日龄时，每头猪灌服70mL大肠杆菌菌液(109cfu/mL)进行攻毒试验，比较攻毒前后血常规(白细胞总数、粒细胞数、淋巴细胞数、中间细胞数、淋巴细胞比率、中间细胞比率)的变化，研究结果如下：
　　 (1)荣昌猪BPI基因外显子3和外显子4基因型及基因频率：外显子3检测到GG和HH2种基因型，频率分别为0.67、0.33，等位基因G和H的频率与基因型频率一致。外显子4检测到AA、BB、BC和CC4种基因型，频率分别为0.57、0.26、0.16和0.01，等位基因A、B和C的频率分别为0.57、0.34和0.09。荣昌猪BPI基因外显子3和外显子4存在GGAA、GGBB、GGBC、GGCC、HHAA和HHBB6种组合基因型，频率分别为0.30、0.21、0.15、0.01、0.27和0.06。
　　 (2)荣昌猪BPI基因不同基因型与血常规及免疫指标的相关分析：外显子3中GG基因型个体的血小板大细胞比率显著高于HH基因型个体(P<0.05)，其他指标差异不显著(P>0.05)；外显子4中BB基因型个体的红细胞分布宽度SD和红细胞分布宽度CV显著高于BC基因型个体(P<0.05)，且BB基因型个体的红细胞分布宽度SD显著高于AA基因型个体(P<0.05)，其他基因型间的免疫指标差异不显著(P>0.05)；GGBC、HHAA和HHBB三种基因型个体的白细胞总数和中间细胞数都显著高于GGAA和GGBB(P<0.05)，其中GGAA基因型个体的中间细胞数显著高于GGBB基因型个体(P<0.05)，GGBB、HHAA和HHBB三种基因型个体的红细胞分布宽度SD和红细胞分布宽度CV都显著高于GGAA和GGBC基因型个体(P<0.05)，GGBB、GGBC和HHAA三种基因型的红细胞平均体积都显著高于GGAA和HHBB基因型个体(P<0.05)。
　　 (3)荣昌猪BPI不同基因型个体对抗病能力的影响：攻毒前后比较，HH基因型个体的淋巴细胞数和淋巴细胞比率显著降低(P<0.05)；AA基因型个体的粒细胞数、淋巴细胞数和中间细胞比率显著降低(P<0.05)，BB基因型个体的淋巴细胞比率和中间细胞比率显著降低(P<0.05)；HHBB基因型个体的全部指标都极显著降低(P<0.01)，HHAA基因型个体的白细胞总数和淋巴细胞数显著降低(P<0.05)；攻毒后，外显子3中HH基因型个体的白细胞总数变化和淋巴细胞数变化极显著高于GG基因型个体(P<0.01)，其他指标差异不显著(P>0.05)。