大鼠骨髓间充质干细胞体外培养及其分化为神经元样细胞的实验研究

摘要

目的: 本研究通过建立大鼠BMSCs体外分离、纯化的培养方法，观察G-CSF对BMSCs增殖的影响，并对G-CSF和GDNF在BMSCs神经细胞分化中作用进行探讨。 方法: 1、无菌条件下采集2周龄SPF级SD大鼠的股骨和胫骨的骨髓细胞，使用含10％FBS的DMEM/F12培养液进行培养，从细胞贴壁性、免疫表型和脂肪分化三方面进行BMSCs鉴定： 2、MTT法测定G-CSF对BMSCs增殖的影响； 3、取P5细胞，10ng/ml bFGF进行预诱导24h后，按GDNF和不同浓度的G-CSF组合分组(B1-5)进行成神经元细胞诱导，并从细胞形态变化、RT-PCR对GFR-α1mRN,A表达水平进行检测，鉴定诱导所得细胞； 4、统计学数据均用均数士标准差(-x±s)表示，采用SPSS13.0软件处理，方法是单因素方差分析和g检验法，检验水准α=0.05。。 结论: 1、差速贴壁法可以有效地分离纯化BMSCs； 2、G-CSF可有效地促进BMSCs增殖； 3、联合应用GDNF和适宜浓度的G-CSF，比单用GDNF更有效地诱导BMSCs分化为表达GFR-α1的神经元样细胞。

目录

声明

1前言

1.1研究背景

1.2研究目的

1.3研究内容

2材料与方法

2.1主要器材

2.2主要试剂

2.3主要试剂的配制

2.4实验动物

2.5实验方法

3结果

4讨论

5小结

参考文献

粒细胞集落刺激因子神经保护作用的研究进展

致谢

附录