精神分裂症患者血浆单胺类神经递质与利培酮临床疗效关系的研究

摘要

目的：
　　 中枢神经系统生化研究发现，某些中枢递质在调节和保持正常的精神活动方面起着重要的作用，而许多抗精神病药物的治疗作用也和某些中枢神经递质或受体的功能密切相关，DA及其受体的异常在精神分裂症的发病和治疗中有着重要意义。利培酮(Risperidone)是人工合成的5-HT2/D2受体混合拮抗剂，其特点是相对弱的D2受体拮抗能改善阳性症状和有限地导致锥体外系反应(EPS)，较强的5-HT2受体拮抗能改善阴性症状及情感症状，并部分抵消D2拮抗所致的EPS。生理状态下，多巴胺通过氧化脱胺途径代谢为高香草酸，通过测定血浆HVA(pHVA)的动态变化，探讨精神分裂症患者多巴胺代谢产物-血浆高香草酸(pHVA)含量的变化与利培酮药物治疗的临床意义为本研究的目的。
　　 方法：
　　 一、单胺类神经递质的HPLC-荧光检测方法学探讨：
　　 1.大鼠脑组织匀浆中单胺类神经递质的HPLC-荧光检测方法学探讨
　　 采用HPLC-荧光检测方法测定大鼠脑组织中的重酒石酸去甲肾上腺素(NE)、酪氨酸(TRS)、盐酸多巴胺(DA)、3，4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、盐酸5-羟色胺(5-HT)、色氨酸(TRP)7种单胺类递质及相关物质。大鼠脑组织匀浆用提取液(含0.1mol·L-1HC104和0.2mmol·L-1 EDTA)提取，提取液配制成系列浓度的溶液，制备上述7种物质的对照品溶液，分别进样分析，记录峰面积，并按外标法计算含量。色谱柱用Waters Nova-Pak C18(150mm×3.9mm，4um)；流动相为甲醇-缓冲液(14:86)；流速1.0 ml·min-1；荧光检测波长=280 nm，M=330nm。
　　 2.人类血浆高香草酸的HPLC-荧光检测方法
　　 采用反相高效液相色谱电化学检测法(HPLC-ECD)测定血浆pHVA，血浆样品1.0ml，加1.0mol/L氢氧化钠溶液0.2ml，混匀后加乙醚4.0ml，振荡提取3min，3000r/min离心10min，准确吸取乙醚层3.2ml，于40℃水浴中氮气吹干，残渣加甲醇50ul溶解，取20ul进样分析。用pHVA标准品绘制标准曲线，流动相：为缓冲液(3 mmol/L的庚烷璜酸钠，100 mmol/L的醋酸钠，85 mmol/L的柠檬酸，0.2mmol/L EDTA调pH=3.7)与甲醇的混合液(混合比例为，92：8)；色谱柱：BDS C18色谱柱(大连依利特公司)4.6mm×200mm粒度5um；检测器电极及电压：玻璃碳电极；检测电压：0.6 V；高压泵流速：0.8 mL/min。
　　 二、精神分裂症患者血浆单胺类神经递质与利培酮临床疗效关系的研究
　　 1.精神分裂症患者与对照组的选择
　　 精神分裂症患者的选择符合中国精神障碍分类与诊断标准第3版精神分裂症诊断标准；入组前1周未服用过抗精神病药、抗抑郁药、抗躁狂药和抗癫痫药。排除任何器质性脑部疾病。对照组均同期来源于本院的健康自愿者，无精神疾病的既往史和家族史。
　　 2.利培酮的应用方法及治疗过程
　　 患者组均口稳定剂和抗癫服利培酮2～6mg/d，疗程6个月。治疗期间如出现锥体外系反应可适当加用苯海索2～4 mg/d。禁用其他抗精神病药，抗抑郁药，心境痫药。
　　 3.血浆高香草酸的HPLC-荧光检测的方法
　　 患者组分别于治疗前0周和治疗第六月末晨7时采静脉血5ml，对照组取一次静脉血5ml，测定血浆高香草酸的浓度。
　　 4.精神分裂症患者症状量表的临床研究方法
　　 临床疗效的评定方法采用阳性和阴性症状量表(PANSS)于治疗前和治疗第六月末各评定一次
　　 5.血浆HVA与临床疗效关系
　　 比较患者组治疗前后的血浆PHA的变化；患者组亦与治疗前和治疗结束后用阳性和阴性症状量表(PANSS)评定临床疗效，并与25名健康者对照，分析患者组治疗前后疗效变化与血浆高香草酸浓度变化的关系。
　　 结果：
　　 1.用HPLC-荧光方法检测大鼠脑组织中单胺类神经递质的结果
　　 在本法测定条件下，各组分实现完全分离且无干扰。
　　 2.用HPLC-荧光方法检测血浆高香草酸的结果：
　　 标准曲线在0.25-8.00 mg·L-1范围内有良好线性，最低定量限为125ng·L-1，日内RSD3.2％，日间RsD3.03％，方法回收率在86％。
　　 3.精神分裂症患者症状量表的研究结果：
　　 以PANSS减分率评定疗效，≥50％为显好，≥25％～49％为好转，<25％为无变化或恶化。患者组治疗前PANSS总分为(75.2±10.7)分，6个月末(43.7±7.8)分，治疗后总分减分值(31.5±11.3)分。
　　 4.精神分裂症患者临床疗效与血浆高香草酸结果的比较：
　　 患者组血浆HVA含量前后的差值与同期PANSS总分减分值呈正相关(r=0.867)，差异有非常显著性(P均<0.01)。
　　 结论：
　　 一些以阳性症状为主的精神分裂症患者其血浆单胺类神经递质高香草酸(pHVA)含量高于正常组，利培酮在改善该类患者的精神症状同时，其pHVA亦明显降低。研究结果表明利培酮对该类患者的临床疗效与降低患者pHVA含量相关；提示临床治疗中观察患者pHVA变化可能作为判断利培酮药物疗效的一个客观指标；药物利培酮减低中枢多巴胺转化，从而改善精神症状，可能为其作用机制之一。