外阴阴道念珠菌病患者危险因素分析及分离菌株基因鉴定与药敏检测

摘要

目的：⑴分析外阴阴道念珠菌病(VVC)的临床特征及相关危险因素。⑵用基因序列分析的方法鉴定分离菌株，了解粤西地区VVC的菌种分布。⑶用ROSCO药敏片法和E-test试条法检测分离菌株对常用药物的敏感性，比较这两种检测方法的一致性。 方法：①收集301例疑似VVC患者的临床资料和阴道分泌物标本，测定阴道pH值，进行分泌物革兰染色镜检及沙堡琼脂培养基(SDA)培养。②186例培养阳性的菌落，纯化后提取其基因组DNA，以基因组DNA为模板，用ITS1/ITS4引物扩增26S rDNA转录间隔区(ITS)或NL1/NL4引物扩增D1/D2区系列，扩增产物送华大基因有限公司测序。用BLAST软件将每个菌株的ITS和D1/D2区序列与GenBank中相应序列比对，确定菌种后将ITS和D1/D2区序列提交至GenBank。③分别用ROSCO药敏片和E-test试条对分离菌株做药敏试验，比较两种方法检测结果的一致性。 结果：⑴危险因素:性生活频率、怀孕次数、人工流产次数、阴道pH值及月经不调与VVC的发生有关(P＜0.05)，而婚姻状况、月经情况、家族史、穿紧身内衣、阴道冲洗、使用抗生素和避孕药、年龄等与VVC的发生无关(P＞0.05)。⑵菌种分布:301例疑似VVC患者的标本共分离出念珠菌186株，其中白念珠菌170株(91.40％)，光滑念珠菌8株(4.30％)，热带念珠菌6株(3.23％)，近平滑念珠菌2株(1.08％)。⑶药敏检测:ROSCO药敏片法对白念珠菌的敏感性依次为伏立康唑＞卡泊芬净＞氟康唑＞伊曲康唑＞咪康唑＞酮康唑＞特比萘芬;E-test试条法5种药物的敏感性依次为卡泊芬净＞伏立康唑＞氟康唑＞伊曲康唑＞酮康唑。两种检测方法对伊曲康唑、卡泊芬净、酮康唑、氟康唑、伏立康唑敏感性的一致率分别为54.12％(92/170)、75.88％(129/170)、56.47％(96/170)、58.24％(99/170)、55.29％(94/170)。经配对x2检验，两种方法对5种药物的敏感性差异均有统计学意义(P＜0.05)。 结论：①性生活频率、怀孕次数、人工流产次数、阴道pH值及月经不调是VVC的危险因素。②粤西地区VVC妇女白念珠菌所占比例最高，其次为光滑念珠菌，热带念珠菌和近平滑念珠菌。③药敏结果表明白念珠菌对卡泊芬净、伏立康唑、氟康唑的敏感率较高，而对伊曲康唑、咪康唑、酮康唑、特比萘芬敏感性较差。④ROSCO药敏片和E-test试条两种方法检测结果存在明显差异。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 研究背景

1．2 研究目的

1．3 研究内容

2 材料与方法

2．1 实验材料

2．2 实验方法

3 结果

4 讨论

5 小结

参考文献

综述 外阴阴道念珠菌病流行病学、病原学及药物敏感性研究

致谢

附录一：1例健康妇女阴道内分离的阿萨希毛孢子菌DNA鉴定及随机扩增多态性DNA分析

附录二：缩写词中英文对照

附录三：在读期间的科研情况

附录四：念珠菌性阴道炎相关因素调查表