自微乳处方体系的建立及水飞蓟宾自微乳胶囊剂的研制

摘要

目的：水飞蓟素(Silymarin)，为菊科植物水飞蓟silybummarianum(L.)Gaertn果实中的有效成分。水飞蓟宾（silibinin，SLB）是水飞蓟素类黄酮混合物中含量最多，活性最强，药理作用最强的成分。目前水飞蓟素已成为世界性的保肝药物，疗效确切，以其为主药的制剂已广泛用于治疗急慢性肝炎及肝硬化等。然而，由于水飞蓟素难溶于水（水中溶解度仅0.0404 mg/mL）,口服后在胃肠道溶出少，吸收少，导致生物利用度低，影响了其临床疗效。另外，据报道，除水飞蓟素外，约40％新发现的先导化合物是脂溶性的，大量中药成分如葛根素、芦丁、莪术油、紫杉醇等也属低水溶性药物。 自乳化给药系统（self-emulsifying drug delivery system, SEDDS）是一种新型的给药系统。当形成的乳液粒径﹤100 nm时，称为自微乳给药系统（self-microemulsifying drug delivery system, SMEDDS），主要作为难溶性药物的载体，以提高其口服吸收。但是SMEDDS属于新型给药系统及给药技术，处方设计多凭经验、处方组成差异较大，同时国内外均未有统一、完整的质量控制标准。本文以葛根素、吲哚美辛、莪术油为模型药物，建立SMEDDS的质量控制标准，探索药物性质与处方组成的规律性，同时以水飞蓟宾为模型药物进行SMEDDS体内外评价。 方法： （1）药物性质与自微乳化处方组成的规律性。选择葛根素、吲哚美辛、莪术油为模型药物，采取正交设计和绘制伪三元相图，以预乳化浓缩物的溶解状况，乳化效率（乳化速度、乳化程度），乳化结束及24h微乳液的稳定性（液面浮油层、药物沉淀）等指标对自微乳化系统中的油相、乳化剂及助乳化剂的组成、组成比例进行研究，筛选最佳处方，并与三个模型药物的市售产品或自制品进行体外溶出度的评价。 （2）水飞蓟宾自微乳化给药系统（SLB-SMEDDS）研究。采用紫外分光光度法测定25℃时SLB的溶解度，正辛醇－水的不同比例下及不同的pH值下SLB的油水分配系数。 通过正交设计和伪三相图的绘制，以前述评价指标，即预乳化浓缩物的溶解状况，乳化效率（乳化速度、乳化程度），乳化结束及24h微乳液的稳定性（液面浮油层、药物沉淀）进行SLB-SMEDDS设计，并将SLB-预乳化浓缩液（Pre-microemusion concentrate,PMC）填充进硬胶囊，进行体外溶出度，稳定性，大鼠体内药物动力学评价。 （3）SLB磷脂复合物自微乳给药系统研究。通过单因素考察结合正交设计将SLB制成磷脂复合物，测定了该复合物的溶解度和油水分配系数，进一步制成自微乳给药系统。 结果： （1）药物性质与自微乳化处方组成的规律性。葛根素、吲哚美辛、莪术油的最佳自微乳化给药系统公共处方体系除主药外，主要由吐温80、油酸乙酯、PEG400组成。按最佳处方制备的葛根素、吲哚美辛、莪术油自微乳化给药系统所形成的微乳的粒径分别为14.2、18.0、 66.4 nm，在人工胃液（肠液）的溶出度20分钟内均已超过95％，高于对照片（胶囊）。 （2）SLB自微乳化给药系统（SLB-SMEDDS）研究。SLB的溶解度为33.8μg/mL，其在正辛醇－水体系中达到分配平衡的时间为6 h，分配系数随着水层比例的增加而增大，当醇：水为1：6时，分配系数为3.87，随着pH的增加，SLB的油水分配系数先增大，在pH5.0时达到最大值8.2，随后分配系数开始减小。 SLB最佳自微乳化给药系统处方组成及其比例为SLB: 中链甘油三酯：Cremophor RH40：PEG400＝3.85：16.15：60：20，所形成的微乳的平均粒径为14.6nm，在人工胃液和人工肠液中16 min内累积溶出百分率均超过95％,而自制SLB颗粒胶囊基本不溶出。4℃及室温稳定性试验显示SLB-PMC在3个月内外观及含量均没有改变，强光照射(4500±500)Lx加速试验显示15天内浓缩液颜色逐渐加深，含量略有下降。 SLB- PMC和SLB颗粒浓度－时间数据符合一级吸收单室模型，SLB- PMC的Cmax为0.70 μg/mL，而自制SLB混悬剂仅为0.104μg/mL SLB- PMC的AUC比SLB混悬液提高了11.7倍，其相对生物利用度为1265.22％。 （3）SLB磷脂复合物SMEDDS研究。SLB磷脂复合物的最佳工艺条件为，反应温度50℃，反应时间2h，比例1：2。按此最佳工艺条件制备SLB磷脂复合物，复合率为100％，其溶解度和油水分配系数分别为126.3μg/mL，166.64，其最佳自微乳给药系统组成及比例为，复合物：油酸乙酯：吐温80：丙二醇＝12：30：45：13。按最佳处方制备的SLB磷脂复合物-PMC在人工胃液中36min内累积溶出百分率已达到80％。 结论： 本研究建立的自微乳给药系统公共处方体系，适合具有不同溶解度及油水分配系数的难溶性药物，在处方组成一致及处方总量不变的情况下，根据药物的浓度不同，适当调整组成比例均能得到满意效果。该公共处方体系已经申请了专利（申请受理号200810025617.3）。 采用多指标综合评价方式进行自微乳给药系统处方设计，评价指标全面、细化和量化，对于科学、客观及全面评价自微乳给药系统的质量具有一定的示范作用。 制成自微乳给药系统后，不同溶解度及油水分配系数的难溶性药物的体外溶出度均比对照片（胶囊）有了显著的提高，SLB-PMC对SLB颗粒的大鼠体内相对生物利用度也达到了1265.22％，证明自微乳给药系统确实可以有效的提高难溶性药物的体内吸收，其处方组成及制备工艺简单，是具有良好应用前景的制剂新技术与新剂型，SLB磷脂复合物尽管溶解度及油水分配系数均有所增加，但SLB磷脂复合物的体外溶出度没有明显改善，SLB磷脂复合物SMEDDS并不比SLBSMEDDS有更高的溶出度。