广东桉叶灭螺成分提取分离及其活性筛选研究

摘要

本文以广东省樟木头林场的主要桉树种类—托里桉、柠檬桉、巨桉、尾叶桉、赤桉和尾巨桉共6种桉树叶为研究对象，研究了广东桉叶化学成分的提取分离、挥发油成分分析及其灭螺药理活性追踪，研究结果对广东桉树种植和综合利用具有重要指导意义。主要研究内容和结果如下：
　　（1）托里桉等6种桉叶采用水提醇沉法，得到对应的挥发油、水溶性挥发成分、水提物和醇沉物4个部位,结合药效活性追踪的方法，筛选具有灭螺药理活性有效部位,再将有效部位水提取物通过系统有机溶剂分离法分成7个不同的极性部位。另外具有药理活性的挥发油采用低温结晶、硅胶柱色谱、重结晶等手段对其进行分离纯化得到各个组分,各组分进一步采用室内灭杀钉螺药理活性追踪实验并筛选出具有灭杀钉螺作用的有效成分。
　　（2）首先设计L9（34）正交表实验,探究广东柠檬桉叶挥发油提取工艺，确定了最佳提取工艺条件为：A1B3C1D3。按照2010年版《中国药典》一部附录ⅩD“挥发油测定法”甲法采用水蒸气蒸馏法提取了托里桉等6种桉树叶片的挥发油，利用气相色谱-质谱联用技术对上述6种桉叶挥发油的化学成分进行了定性定量分析。结果显示，托里桉等6种桉叶挥发油的提取率为0.04％～3.05%(以干重计)。6种桉叶挥发油化学成分中单萜化合物的相对百分含量为（52.58%～90.93%），倍半萜化合物的相对百分含量为（1.51%～33.58%）。托里桉叶挥发油主要成分为α-松油醇、苯甲醛和长叶烯;柠檬桉叶挥发油的主要成分为香茅醛和香茅醇;巨桉叶挥发油的主要成分为α-蒎烯、对伞花烃）和1,8-桉叶油素;尾叶桉叶挥发油的主要成分为1,8-桉叶素和α-蒎烯;赤桉叶挥发油的主要成分为α-蒎烯、1,8-桉叶油素和2-蒈烯;尾巨桉叶挥发油的主要成分1,8-桉叶油素和α-蒎烯。
　　（3）对广东托里桉等6种桉叶提取分离的各个部位采用室内灭杀钉螺药理活性追踪实验进行灭螺活性筛选研究。托里桉等6种桉树叶提取挥发油和尾叶桉叶水提物均有较好的杀钉螺效果，且柠檬桉叶和尾叶桉叶挥发油要好于其他品种；尾叶桉叶水提物灭杀钉螺有效成分主要分布在石油醚萃取物和氯仿萃取物，且氯仿萃取物的杀钉螺效果要好于其他有机溶剂萃取物。
　　（4）对柠檬桉叶和尾叶桉叶挥发油不同极性洗脱组分进一步采用室内灭杀钉螺药理活性追踪实验筛选研究。结果显示，柠檬桉挥发油在石油醚、乙酸乙酯（100:0），（100:5）和（9:1）共3个浓度洗脱部位均具有较好的杀钉螺活性，且石油醚、乙酸乙酯(100:5)和(9:1)两个比例的洗脱部位的效果要好于其他组分。尾叶桉挥发油在石油醚、乙酸乙酯（100:1）、（100:2）、（100:3）和(5:1)共4个浓度洗脱部分均具有较好的杀钉螺效果。
　　（5）综上所述，托里桉等6种桉叶挥发油及其萜类化合物(其中香茅醛、1,8-桉叶油素和α-松油醇等)均具有较好的杀钉螺效果。研究结果显示，用不同浓度的广东桉叶提取物处理液浸杀钉螺，在不同时间的处理下，钉螺死亡率存在差异。其规律是钉螺死亡率随溶液浓度和浸杀时间的增加而升高，10、50、100 mg/L的溶液具有40%~100%的杀灭效果，50 mg/L低浓度溶液处理48 h后，钉螺的死亡率能达到60%以上。其中起驱虫、杀虫和诱虫药理活性作用的成分与其所含的萜类化合物及其衍生物有很大关系，其有效成分及灭螺作用机制有待于进一步深入研究,为探讨广东桉叶灭螺作用机制及对灭螺药物的深入研究开发提供了参考资料。

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前言

第一章 绪论

1.1灭螺药物的研究概况

1.2桉树的研究现状

1.3立题依据

第二章 广东桉叶的有效成分提取与分离

2.1实验部分

第三章 广东桉叶挥发油化学成分研究

3.1 柠檬桉叶挥发油提取工艺研究

3.2广东桉叶挥发油化学成分分析

3.3实验方法

3.4实验结果

3.3 小结

第四章 广东桉叶提取物灭螺活性研究

4.1广东桉叶灭螺有效部位初筛选试验

4.2 尾叶桉叶水提物灭螺有效组分筛选试验

4.3 柠檬桉叶挥发油灭螺有效组分浸杀钉螺试验

4.4尾叶桉叶挥发油灭螺有效组分浸杀钉螺试验

第五章 结论与展望

5.1实验结论

5.2 展望

参考文献

附录一攻读硕士学位期间发表的论文

附录二缩写词中英文对照

致谢