HSV-1在正常人的虹膜、睫状体、视网膜潜伏的初步研究

摘要

背景与目的：眼部主要是单纯疱疹病毒I型(Herpessimplexvirus,HSV-1)感染，以往的研究发现HSV-1病毒主要潜伏在三叉神经节、颈交感神经节等部位，后来在鼠的虹膜、睫状体、颈上神经节、人的角膜、杏仁体、海马、脑干等部位发现HSV-1，近年来在睫状神经节、翳状胬肉也发现了HSV-1。已经证实角膜是HSV-1的另一个眼部潜伏部位。三叉神经支配角膜、虹膜、睫状体。虹膜、睫状体是否同角膜一样存在HSV-1潜伏，目前尚不明确；HSV-1可引起急性视网膜坏死综合征，视网膜是否是HSV-1潜伏的部位，目前缺乏研究。本研究采用细胞培养、免疫组化和PCR的方法，探讨正常人虹膜、睫状体、视网膜是否存在HSV-1的DNA和潜伏相关转录本功能片段(Latencyassociatedtranscript,LAT)。 方法：采用正常健康志愿者捐献的新鲜眼球20个，在穿透性角膜移植手术后的供体眼球上，取1/3眼球组织进行免疫组化染色，排除HSV-1急性感染。从免疫组化染色阴性的眼球中取出剩余的虹膜、睫状体、视网膜，分别将每个眼球的虹膜、睫状体、视网膜组织的1/3进行离心，取上清液与Vero细胞共培养，并盲传三代，检查有无活性HSV-1存在；另外2/3组织提取DNA作PCR和凝胶电泳检测有无HSV-1的DNA和LAT。 结果：1.20个标本免疫组化染色皆阴性，无HSV-1急性感染。 2.Vero细胞分别与虹膜、睫状体、视网膜组织上清液共培养，并盲传三代结果为阴性，未观察到细胞病理学改变，对照组有阳性表现，表现为Vero细胞气球样变、核固缩、多核巨细胞甚至细胞悬浮死亡。 3.PCR检测20个人的虹膜、睫状体、视网膜标本中，4个睫状体标本的HSV-1DNA阳性，3个视网膜标本的HSV-1DNA阳性，其他虹膜、睫状体、视网膜标本PCR检测HSV-1DNA阴性。所有的虹膜、睫状体、视网膜标本HSV-1LAT结果阴性。 结论：正常人眼睫状体、视网膜存在HSV-1DNA，提示在睫状体、视网膜可能有HSV-1的潜伏，成年人单纯疱疹病毒性睫状体炎、急性视网膜坏死的发生可能与上述部位潜伏的HSV-1有关，这将为下一步研究HSV-1在睫状体、视网膜复发的机制提供新的思路。

目录

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英文缩写词表

前 言

第一部分人眼的虹膜、睫状体、视网膜的免疫组化检测排除HSV-1急性感染确定纳入标准

材料与方法

结 果

讨论

小 结

第二部分虹膜、睫状体、视网膜组织上清液与Vero细胞共培养并传代检测虹膜、睫状体、视网膜组织是否存在活性的HSV-1

材料与方法

结 果

讨 论

小 结

第三部分人眼虹膜、睫状体、视网膜组织PCR方法检测HSV-1 DNA和HSV-1 LAT

材料与方法

结 果

讨 论

小 结

全文结论

图 片1

图 片2

图 片3

参考文献

致 谢

文献综述单纯疱疹病毒Ⅰ型在眼部发病途径的研究进展

研究生期间发表论文