诃子拮抗内毒素活性组分的分离制备及生物学活性评价

摘要

目的：内毒素(LPS)是G-细菌外膜的主要成分，是引起脓毒症的主要病原分子。LPS通过其活性中心LipidA与细胞表面的受体结合，介导脓毒症的发生。因此，阻断LipidA与其受体的结合是防治脓毒症的关键之一。大量的实践证明：某些中草药具有拮抗脓毒症的功效，而且来源广泛、培植周期短、加工简便，有良好的应用前景。本课题以LipidA为靶点，应用生物传感器技术平台，从78种中药中筛选出与lipidA具有较高结合活性的诃子并从诃子中定向分离具有拮抗内毒素作用的活性组分并对其生物学活性进行评价。 方法：(1)应用生物传感器技术，对诃子、大青叶、大黄等78种中草药进行与LipidA结合活性的筛选。(2)利用硅胶柱层析、聚酰胺柱层析、离子交换-HPLC等技术，对筛选出的与LipidA具有较高结合活性的诃子进行定向分离，并用生物传感器进行与LipidA的结合活性跟踪观察。(3)体外观察活性组分对LPS的中和作用及对LPS和CPGODN刺激的RAW264.7细胞分泌炎症介质的抑制作用。(4)在体内，观察其对LPS及热灭活大肠杆菌攻击小鼠的保护作用。 结果：(1)在所筛选的78种中草药中，诃子、地榆、大黄等12种中药水提物具有与lipidA较高的结合活性；其中诃子水提物与lipidA的特异性结合活性成分的含量较高。(2)从诃子中定向分离出3个与LipidA具有结合活性的组分，其中以诃子组分3的结合活性最高。(3)体外实验显示，诃子组分3对LPS具有显著的中和作用；对LPS和CPGODN刺激的RAW264.7细胞分泌炎症介质具有显著的抑制作用，并呈现良好的量-效关系。(4)体内研究显示，诃子组分3对LPS及热灭活大肠杆菌攻击的小鼠均具有显著的保护作用。 结论：以LipidA为靶点，从诃子中定向分离出一个具有拮抗脓毒症作用的水溶性活性组分；其在体内外均具有较强的拮抗LPS活性，可能具有重要的药用价值。

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英文缩写索引

摘要

前言

第一部分以lipid A为靶点应用生物传感器筛选抗炎中药

第二部分诃子拮抗内毒素活性组分的定向分离

第三部分诃子组分拮抗内毒素活性的评价

第四部分诃子组分3的生物学活性评价

全文结论

致谢

参考文献

文献综述抗内毒素中药研究现状

研究生学习期间撰写论文