戊酸雌二醇对去势大鼠子宫阴道雌激素受体α和β表达的影响研究

摘要

背景和目的： 目前绝经期综合征多采用激素替代疗法(HormoneReplacementTherapy，HRT)，但长期使用非对抗性雌激素易引发子宫内膜增生，增加子宫内膜腺癌的危险性。另外绝经期雌激素水平下降还可造成女性泌尿生殖道支撑组织萎缩和张力减退，引发压力性尿失禁(Stressurinaryincontinence，SUI)，而雌激素替代治疗SUI的疗效不甚理想，有学者假设可能与雌激素受体(Estrogenrecepter，ER)亚型比例变化相关。子宫、阴道组织中ERα、ERβ分布及含量改变可以引起雌激素类药物作用效应的差异。目前关于绝经期子宫、阴道组织中ERα、ERβ的分布及含量变化，两种受体亚型介导雌激素生物效应的差异及相互作用，国内外的研究结果不相一致。 本研究采用免疫组化、免疫荧光双标(DLTI)激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)及半定量RT-PCR技术，观察成年SD雌鼠、去势及药物干预后大鼠子宫、阴道ER亚型的分布及共表达状况，初步探讨ER亚型及ERα/ERβ值的变化与子宫内膜增殖、阴道萎缩之间的关系，为研究外源性雌激素对子宫、阴道ER亚型的调节及绝经后妇女合理补充雌激素提供理论和实验依据。 主要方法和结果： 1.80只4月龄体重320～350g健康雌性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、去势组、去势+戊酸雌二醇组(药物组)，每组20只。正常组未经干预，假手术组打开腹腔但不切除卵巢，药物组于术后4周用戊酸雌二醇生理盐水混悬液连续灌胃8周后处死大鼠。观察大鼠子宫、阴道大体形态学改变和组织学改变，并检测血中雌二醇和卵泡刺激素水平。结果：去势组于术后连续5天阴道上皮涂片染色无规律的动情期改变。去势组子宫、阴道明显萎缩，体积减小，药物组子宫、阴道湿重显著增加。HE染色去势组子宫内膜全层萎缩，腺体稀疏；阴道壁变薄，黏膜上皮萎缩。予雌激素后，子宫内膜明显增厚，腺体密集，偶可见腺腔囊状扩张；阴道壁轻度增厚，出现特征性皱褶结构。去势组大鼠血清雌二醇浓度明显降低、FSH水平明显升高，药物组E2水平较正常组、假手术组高。 2.免疫组化SP法检测ERα、ERβ蛋白；应用免疫荧光组织化学双标记染色技术，在激光共聚焦扫描显微镜下观察ERα、ERβ的表达情况；半定量RT-PCR检测ERαERβmRNA的表达水平。结果：1)去势组子宫ERa蛋白表达均较正常组和假手术组明显减弱，ERβ几乎未见表达，ERα/ERβ值升高。药物组ERα蛋白的表达较去势组、正常组和假手术组明显增强，ERβ表达无显著改变，ERα/ERβ值显著升高。去势组ERmRNA表达降低，以ERβ降低更显著。药物组ERαmRNA表达较去势组明显增强，甚至高于正常组。2)去势组阴道ERα蛋白表达水平较正常组、假手术组降低，ERβ表达水平下降更为明显，ERα/ERβ值升高。药物组鳞状上皮细胞ERα蛋白表达较去势组明显增强，基质纤维细胞和平滑肌细胞ERβ表达无改变，ERα/ERβ值显著升高。去势组ERmRNA表达均降低，以ERβ表达下降更为显著，药物组ERαmRNA表达较去势组明显增强。 结论： 1.从组织形态学和功能上均证实去势大鼠模型的成功建立。 2.去势大鼠子宫ERα、ERβmRNA及蛋白的表达均下降，以ERβmRNA和蛋白的表达下降更显著，ERα/ERβ值升高。戊酸雌二醇明显上调去势大鼠子宫ERαmRNA和蛋白的表达，对ERβmRNA和蛋白的表达无明显影响，ERα/ERβ值进一步升高。 3.去势引起的雌激素水平下降，造成阴道组织三种细胞ER亚型表达的下降或缺失，ERβmRNA和蛋白的表达下降更显著，ERα/ERβ值升高。雌激素替代治疗明显上调鳞状上皮细胞ERα蛋白的表达；ERT对基质纤维细胞和平滑肌细胞ERβ蛋白的表达无影响。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩写一览表

声明

前 言

第一部分去势大鼠动物模型的建立、药物干预及评价

前言

材料和方法

结 果

讨 论

小 结

第二部分戊酸雌二醇对去势大鼠子宫雌激素受体α和β表达的影响

前言

材料与方法

结 果

讨 论

小 结

第三部分戊酸雌二醇对去势大鼠阴道雌激素受体α和β表达的影响

前言

材料和方法

结 果

讨 论

小 结

全文结论

致 谢

照 片

参考文献

文献综述一雌激素受体及其与绝经相关疾病的关系研究现状

文献综述二雌激素β受体及其与卵巢癌的关系研究进展

研究生期间发表的论文