预先电刺激小脑顶核对脑缺血溶栓时间窗内、外预后的影响及机制

摘要

在中国，缺血性脑血管病(Ischemic cerebrovascular disease，ICD)已由90年代第二位致死因素上升至第一位，防治ICD的形势日益严峻。然而其高危因素和发病机制尚不清楚，要达到预防为主的目的遥不可期。循证医学数据显示4.5h内重组人组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)静脉使用溶栓是当前治疗ICD仅有的有效的方法，许多试验表明，溶栓能尽快开通闭塞的血管，恢复血流量，挽救处于可逆状态的半暗区细胞，限制梗死进一步扩大，改善预后，降低致残率，提高患者的生活质量。但相当比例的患者在发病后到达医院时已经失去了溶栓的机会，不能从这一有效的治疗方式中获益。rt-PA的使用具有显著的时间依赖性，时间窗外溶栓治疗因继发严重缺血再灌注损伤(Ischemia-reperfusion，I/R)导致弊大于利。但从长远功能恢复的角度来看，血管再通是必要的，原因在于病损区的功能恢复需要血流再通送去氧及其他营养物质，有助于患者后期功能的恢复和重建，所以，如果能够对抗缺血再灌注损伤，无疑可以延长溶栓时间窗。越来越多的研究证明，电刺激小脑顶核(fastigial nucleus stimulation，FNS)可启动内源性神经保护机制从多方面对抗缺血再灌注损伤，但FNS启动的内源性神经保护作用对rt-PA溶栓时间窗的影响尚不清楚，本研究着重于探讨FNS启动的内源性神经保护对大鼠ICD溶栓时间窗的影响，并从炎症的角度探讨了相关的机制。
　　目的:
　　探讨预先FNS对急性脑梗死溶栓治疗时间窗内、窗外溶栓治疗预后的影响及其机制，深化非药物治疗措施对缺血脑血管病的作用认识。
　　方法:
　　将60只SD大鼠按照随机数字法分成FNS组和对照组，FNS组栓塞前予以FNS预处理1h，对照组不予FNS处理。制备自体血栓大脑中动脉栓塞-溶栓再通大鼠模型，分别在栓塞后1、3、6、9、12、15h予以rt-PA溶栓处理。待麻醉清醒后予以神经功能评分。记录术后至72h的死亡率，栓塞后72h处死大鼠，断头取脑，予以三苯基四氮化氯(2，3，5-TriPhenyltetrazolium chloride，TTC)染色评估脑梗塞情况，计干湿重评估脑水肿情况。取梗塞边缘半暗带的脑组织进行Western blot(WB)和荧光定量聚合酶链反应PCR(Polymerase chain reaction，RT-PCR)检测PPARγ表达水平，比色法检测半暗带髓过氧化物酶(Myeloperoxidase，MPO)活性。
　　结果:
　　1、成功构建自体血栓大脑中动脉栓塞-溶栓再通(MCAO/R)大鼠模型。
　　2、FNS组的神经功能评分较对照组明显降低，时间窗内溶栓两组比较，FNS组评分较对照组低，但差异无统计学意义(p＞0.05);在15h溶栓时间点降低更显著，FNS组评分(2.74±0.55)较对照组(1.90±0.54)低，差异有统计学意义(p＜0.05)。预先FNS可降低1、3、6、9、12h溶栓大鼠72h内的死亡率。
　　3、预先FNS可显著改善脑缺血再灌注后大鼠脑梗塞的情况，FNS大鼠大脑组织TTC染色梗塞面积较对照组明显减少，脑水肿程度减轻，尤其在6h、9h溶栓时间点差异显著，具有统计学意义(p＜0.05)。
　　4、FNS组WB和RT-PCR结果显示FNS组缺血半暗带PPARγ表达水平较对照组增加，并随着栓塞-再灌注时间的延长，表达量逐渐增多，在6h、9h再灌注时间点与对照组比较有显著差异(p＜0.05)。在9h再灌注时间点前后达高峰，随后表达量减低，但仍高于对照组。电刺激组与对照组随再灌注时间的延长，MPO表达增加，但电刺激组MPO活性较对照组低，在3、6、9、12h再灌注时间点差异有统计学意义(p＜0.05)。
　　结论:
　　1、预先FNS可改善缺血再灌注脑损伤的预后。FNS对较长时间溶栓时间仍有一定的保护作用但不显著，这也可能提示FNS介导的炎性反应在脑缺血半暗带组织可能有一个延迟效应。
　　2、这种对预后的改善可能是FNS通过激活PPARγ抑制过度炎性反应的损伤有关。
　　3、综上，我们的研究提示了FNS可适当延长大鼠局灶脑缺血溶栓时间窗，这将为防治缺血性脑卒中提供新的治疗方向。

目录

声明

缩略语表

摘要

第一章 前言

第二章 预先FNS对局灶脑缺血溶栓预后的影响

2．1 材料和方法

2．2 结果

第三章 预先FNS对局灶脑缺血溶栓影响相关机制探讨

3．1 材料和方法

3．2 结果

第四章 结论

全文总结

参考文献

文献综述 电刺激小脑顶核在缺血性脑血管病中的神经保护机制及临床应用前景

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