EGFR敏感突变肺腺癌患者纵膈淋巴结转移相关基因的检测与分析

摘要

近年来，肺癌的诊疗水平取得了显著的提高，但手术后5年总生存率仍不到50％。在肺癌各类型中，非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)所占比例高达80％。精确分期对于NSCLC患者不仅有利于合理的治疗方案制定，还有利于预后的评估。目前国际上通用分肺癌分期系统是TNM分期，而肺癌的TNM分期的关键及挑战在于对纵膈淋巴结(mediastinal lymph nodes MLN)的状态的判断。正电子发射断层成像术(Positron emission tomography，PET)在肺癌的临床分期中价值日益突出，可以用于肺部病灶的诊断、MLN分期、远处转移灶的发现以及患者的治疗反应和预后的评价，还可以指导术后或根治性放射治疗靶区勾画。然而，单纯PET不能提供病灶精确的解剖位置，PET/CT融合技术能完美结合PET的功能信息和CT的解剖信息，SEN及ACC大大提高，但PET/CT仍存在一部分假阴性和假阳性。新近研究表明，差异表达基因可作为肺癌纵膈淋巴结转移生物预测因子。因此，本研究第一部分主要探讨手术前PET/CT和增强CT检查对肺癌MLN转移的诊断价值;第二部分先后通过二代测序、高内涵筛选（high content screening，HCS）筛出肺癌淋巴结转移关键基因。
　　研究目的:1.比较手术前肺癌患者MLN PET/CT及胸部增强CT的影像学检查情况与术后病理诊断，探索PET/CT和增强CT检查在肺癌MLN转移中诊断效果。
　　2.先后通过转录组测序、生物信息分析、高涵量筛选等方法，检测并筛选出肺癌MLN转移密切相关的关键基因。
　　研究方法:1.收集94例经病理确诊的肺癌患者的243组纵膈淋巴结，且手术前半月内行PET/CT和胸部64排增强CT检查，分别记录纵膈淋巴结情况。影像学阳性诊断标准:PET/CT SUVmax≥2.5，增强CT:淋巴结短径≥10mm或存在液化坏死。金标准:术后纵膈淋巴结病理结果，数据统计分析使用的是SPSS12.0软件。
　　2.分别检测伴和不伴纵膈淋巴结转移的EGFR敏感突变肺腺癌临床标本转录组表达谱，筛选出差异表达基因(Differentially expressed genes，DEGs);对高表达的差异表达基因(DEGs)进行HCS。
　　研究结果:1.增强CT与PET/CT诊断肺癌纵膈淋巴结的准确度(accuracy，ACC)、敏感度(sensitivity，SEN)、特异度(specificity，SPC)及阳性(positive predictive value，PPV)和阴性预测值(negative predictive value,NPV)分别为80.7％ vs67.5％，P=0.001;79.5％ vs60.3％，P=0.009;81.2％ vs70.9％, P=0.028;66.7％ vs49.5％, P=0.017;89.3％ vs79.1％, P=0.015。
　　2.增强CT与PET/CT融合后纠正错误病例64例，其中增强CT纠正PET/CT错误总共有48例，PET/CT纠正增强CT16例误判。纠正后纵隔淋巴结诊断准确度、敏感度、特异度、PPV、NPV分别为87.2％、85.9％、87.9％、77.0％、92.9％。
　　3.纠正后准确度、敏感度、特异度均明显高于PET/CT，差别具有统计学意义，但和单纯增强CT无显著性差别。
　　4.ZNF296、N6AMT1、TBCC、DDX49、BCDIN3D等5个基因影响肺癌pc-9细胞的增殖。BDH1，DCXR，DDX49，GTF2H5、HYLS1、ISYNA1、TAF8、BCDIN3D、MIA3等9个基因可能参与pc-9细胞的转移进程。
　　研究结论:1.增强CT对肺癌MLN转移的诊断优于PET/CT，将PET/CT与增强CT融合可进一步明确肺癌有无MLN转移。
　　2.ZNF296、N6AMT1、TBCC、DDX49、BCDIN3D等5个基因影响肺腺癌的增殖。BDHl, DCXR, DDX49, GTF2H5、HYLS1、ISYNA1、TAF8、BCDIN3D、MIA3等9个基因可能参与肺腺癌MLN转移进程。

目录

声明

缩略语表

摘要

第一章 前言

第二章 PET／CT与增强CT对评价NSCLC纵隔淋巴结转移的诊断意义

2．1 材料与方法

2．2 结果

2．3 讨论

2．4 小结

第三章 EGFR敏感突变肺腺癌患者纵膈淋巴结转移相关基因的检测与分析

3．1 材料和方法

3．3 结果

3．4 讨论

全文结论

参考文献

文献综述 评估肺癌淋巴结转移研究现状与进展

攻读学位期间发表的论文

致谢