中药黄芩在化妆品中的多功效研究及其安全性评价

摘要

中药黄芩是植物黄芩的根部，是常用中药之一，其在我国药用历史悠久，其主要有效成份为黄酮类化合物，其中以黄芩苷和黄芩素的含量最高。黄芩具有显著的生物活性，如抗炎、免疫调控、抗变态反应等，除此之外，文献还记载了黄芩具有抑制黑色素生成、抗菌等功效。本文从现代生物理论的角度，考察黄芩在化妆品中的多种功效及评价其安全性，为多功效型中药化妆品的研发和推广提供思路及理论基础。本文研究内容如下：
　　1）以黄芩苷和黄芩素为主要有效成分对中药黄芩进行单体提取，运用高效液相色谱法进行单体定性定量；通过生化酶学法，对黄芩苷、黄芩素进行酪氨酸酶抑制率测试，确定黄芩工艺目标成分。结果显示，黄芩素对酪氨酸酶抑制率明显高于黄芩苷，浓度为2 mg/mL时，抑制率可达到60％以上。
　　2）以黄芩素为黄芩提取物含量目标成分，考察黄芩提取液在不同温度、液固比及提取时间下对黄芩素含量的影响，确定各因素水平。并建立三因素三水平响应面分析试验，建立回归模型，进行多项式拟合，得出工艺预测模型并进行验证。结果显示，通过响应面中心组合试验分析，设置三因素三水平分组试验，得出最佳提取工艺为：温度80℃、液固比20 mL/g、提取时间2 h。通过验证试验，实际值与模型预测值基本一致。
　　3）结合现行欧盟OECD发布的替代试验方法，通过离体牛眼角膜浊度法、3T3中性红摄取光毒性法、RBC溶血试验对黄芩提取物安全性进行综合评价。结果显示，在牛眼角膜浊度试验中，计算得出IVIS值均小于3，刺激性结果为温和，不具有眼刺激性。在3T3中性红摄取光毒性法中，无光照条件下黄芩提取液的EC50为86.151 mg/mL，有光照条件下黄芩提取液的EC50为90.048 mg/mL，通过Phototox软件进行两条剂量曲线的对比运算，可得黄芩提取液的MPE=-0.127，PIF=1.046，表明黄芩提取液无光毒性。RBC溶血试验中，半数溶血率HC50=0.0449 g/mL，可认为黄芩提取液无刺激性。
　　4）运用酪氨酸酶抑制法、DPPH自由基清除测试、透明质酸酶抑制法、小鼠耳廓肿胀试验、微生物法对黄芩提取物进行多角度功效研究。结果显示，黄芩提取液浓度为0.2 g/mL时，酪氨酸酶抑制率达到75.87%，半数抑制浓度为0.106 g/mL。黄芩提取液浓度为0.01 g/mL时，DPPH清除率已达到93.09%，浓度增加，其清除率可接近100%。黄芩提取液浓度为0.1 g/mL时，透明质酸抑制率可达到72.1%，半数抑制浓度为0.567 g/mL。黄芩提取液还具有一定的抑制痤疮丙酸杆菌的能力，其最小抑菌浓度为30 mg/mL，抑菌效能略高于水溶性茶树油
　　5）在乳液配方基础上，结合肤感及稳定性评价，优化乳化剂和增稠剂两个体系，并确定黄芩提取液的添加量，制成黄芩低敏美白乳液，并进行人体皮肤斑贴试验及周期性美白功效评价。研究结果表明，最佳乳化剂体系为Tego Care450和酶解卵磷脂复配体系，最佳增稠剂体系为汉生胶和Sepiplus400复配体系，黄芩提取物的添加范围为0.2~1.5%，起效最佳添加量为1.5%，使用60天后可使皮肤黑色素值降低约25。

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第一章 序言

1.1 研究意义

1.2 研究现状

1.3 研究内容

1.4 技术路线

第二章 黄芩中有效成分的提取及研究

2.1 实验部分

2.2 结果与分析

2.3 本章小结

第三章 黄芩提取工艺优化

3.1 实验部分

3.2 结果与分析

3.3 本章小结

第四章 黄芩提取物的安全性评价

4.1 实验部分

4.2 结果与分析

4.3 本章小结

第五章 黄芩提取物多功效研究

5.1 实验部分

5.2 结果与分析

5.3 本章小结

第六章 黄芩低敏美白乳液的配方设计及评价

6.1 实验部分

6.2 结果与分析

6.3 本章小结

第七章 结论

参考文献

攻读学位期间发表的文章

致谢