以肝星状细胞为靶标探讨保肝宁抗肝纤维化作用机制的实验研究

摘要

目的:探讨复方保肝宁抗肝纤维化的主要作用机制.方法:引进HSC-T6细胞株并传代培养.用复方保肝宁给正常大鼠灌胃,制备药物血清,温育培养细胞.用MTT比色法观察细胞增殖,ELISA法测定上清Ⅰ型胶原含量,吖啶澄染色法和流式细胞仪测定细胞凋亡,并用水貂肺上皮细胞生长抑制MTT法检测上清液中总TGFβ<,1>活性,TGFβ<,1>的免疫细胞化学染色采用ABC免疫酶标法.建立FeNTA致HSC-6氧化应激脂质过氧化模型,观察了保肝宁药物血清作用后过氧化氢(H<,2>O<,2>)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量的变化.结论:复方保肝宁能抑制HSC增殖并促进其凋亡,减少TGFβ<,1>分泌和Ⅰ型胶原合成,并能降低FeNTA致HSC氧化应激的脂质过氧化水平.对HSC氧化应激的保护作用,减弱HSC的自分泌放大效应,可能是复方保肝抗肝纤维化的主要机制.

目录

英文缩略词表

引言

实验部分

第一部分：保肝宁对HSC-T6细胞增殖与凋亡的影响

实验材料及方法

实验结果

讨论

第二部分：保肝宁对HSC-T6细胞Ⅰ型胶原及TGFβ1表达的影响

实验材料及方法

实验结果

讨论

第三部分：保肝宁对FeNTA致HSC-T6细胞氧化应激的保护作用

实验材料及方法

结果

讨论

全文小结

参考文献

综述一：中医药抗肝纤维化现状

综述二：以肝星状细胞为靶标的抗肝纤维化治疗进展

研究生期间工作

致谢