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【6h】

小鼠胚胎器官发育的形态学和免疫组织化学研究

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目录

缩略词表

Abstract

前言

第一部分鼠整胚组织切片标本的制作与观察

一、材料与方法

(一)主要试剂和仪器

(二)实验动物的选择

(三)昆明小鼠动情期的观察及胎龄的确定

(四)鼠胚的取材、固定及切片

二、结果

(一)鼠胚外形的观察

(二)鼠胚组织切片标本的观察

三、讨论

(一)鼠胚的取材、固定

(二)鼠胚的脱水、透明及包埋

四、附图与说明

第二部分鼠胚生殖腺发育形态学及免疫组化研究

一、材料与方法

(一)动物

(二)主要试剂和仪器

(三)胚胎标本的取材、固定、切片

(四)苏木精—伊红染色

(五)Oct-4免疫组织化学染色

二、结果

(一)小鼠胚胎生殖腺组织学观察

(二)Oct-4在生殖腺中的免疫组织化学研究

三、讨论

(一)原生殖细胞的起源

(二)生殖腺形成及变化

(三)Oct-4在生殖细胞中的作用

四、附图与说明

第三部分 鼠胚皮肤发育的形态及免疫组化研究

一、材料与方法

(一)动物

(二)主要试剂和仪器

(三)胚胎标本的取材、固定、切片

(四)组织学染色

(五)Masson三色染色法

(六)Nestin免疫组织化学染色

二、结果

(一)皮肤的组织学观察

(二)Nestin免疫组织化学观察

三、讨论

四、附图与说明

第四部分 肝的发生、形态变化及免疫组织化学研究

一、材料与方法

(一)动物

(二)主要试剂和仪器

(三)胚胎标本的取材、固定、切片

(四)组织学染色

(五)糖原的染色

(六)Oct-4免疫组织化学染色

二、结果

(一)鼠胚肝脏的组织学观察

(二)肝糖原合成的出现及变化观察

(三)Oct-4在肝脏中的表达

三、讨论

(一)鼠胚肝脏的发育过程

(二)肝干细胞的来源

(三)Oct-4在胚肝发育中的作用

四、附图及说明

全文小结

参考文献

附录一:综述 原生殖细胞的起源、迁移、增殖及基因表达

附录二:在读期间发表文章

致谢

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摘要

该研究采用昆明小鼠胚胎为实验材料,采用苏木精-伊红染色、Masson染色、PAS染色、免疫组化染色等方法,研究不同发育时期小鼠胚胎生殖腺、皮肤、肝脏内干细胞的起源、迁移和增殖及形态的变化,探讨生殖腺、皮肤、肝脏发育的机制,为胚胎发育的分子水平调控机制的深入研究提供组织学依据.一、鼠整胚组织切片标本的制作与观察;结果表明,改良的组织切片标本制作方法有利于小鼠胚胎组织切片经过不同的染色方法完美地显示细胞和组织的形态及某些化学成分的变化,更重要的是它可保证胚内各个器官位置的相对固定,为胚胎干细胞的迁移以及胚胎发育连续观察的研究提供宝贵资料.二、鼠胚生殖腺发育的形态学及免疫组化研究;采用免疫组织化学的方法标记Oct-4在生殖腺内干细胞中的表达,研究胚胎发育过程中生殖腺的发生、发育机制,同时探讨生殖干细胞新的表面标记蛋白.三、鼠胚皮肤发育的形态学及免疫组化研究; 该研究采用HE和Masson染色的方法研究小鼠胚胎皮肤的动态发育过程,同时应用免疫组织化学技术标记nestin在不同发育时期鼠胚皮肤中的表达,研究皮肤内干细胞的定位和形态变化,探讨皮肤发生发育的细胞生物学机制.四、鼠胚肝组织发育形态变化及免疫组化研究; 该研究采用HE染色研究小鼠胚胎肝脏发育的形态学变化,并采用PAS染色技术研究胚胎发育过程中肝细胞功能的动态变化.

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