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RANKL诱导类风湿性关节炎滑膜CD68阳性细胞分化为破骨细胞的实验研究

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前言

第一部分类风湿性关节炎滑膜CD68+和CD68-细胞筛选及体外活性观察

材料和方法

结果

讨论

第二部分 RANKL体外诱导类风湿性关节炎滑膜CD68+细胞向破骨细胞分化

材料和方法

结果

讨论

参考文献

综述 类风湿性关节炎滑膜组织RANKL/RANK/OPG表达

致谢

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摘要

目的:观察在核因子κB受体活化子配体(RANKL)的作用下,类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)滑膜CD68<'+>细胞在体外分化的特性,探讨RA滑膜CD68<'+>细胞与前体破骨细胞的关系.材料和方法1.取6例RA和6例正常关节的滑膜组织,胶原酶消化法获得滑膜细胞,用免疫磁珠法筛选滑膜CD68<'+>和CD68<'->细胞.流式细胞仪检测筛选效能;CD68抗体免疫组化染色观察RA和正常关节滑膜组织筛选前后滑膜CD68<'+>细胞所占比例.MTT法观察筛选后细胞增殖活性.2.将筛选获得的RA和正常滑膜CD68<'+>和CD68<'->细胞分别直接用外源性的RANKL诱导分化,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、降钙素受体免疫荧光检测、骨吸收陷窝形成等方法鉴定诱导分化后的滑膜细胞.3.在RA滑膜CD68<'+>细胞培养液中加入0ng/ml到8ng/ml不同梯度浓度的RANKL,观察不同浓度RANKL对RA滑膜CD68<'+>细胞分化的影响.结论:1.RA滑膜CD68<'+>细胞是前体破骨细胞的来源.2.RANKL在体外可以诱导RA滑膜CD68<'+>细胞分化为破骨细胞.

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