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PCV2和PRRSV混合感染对仔猪致病性的评估

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独创性声明及关于论文使用授权的声明

第一章绪论

第二章PCV2病毒株的分离鉴定

第三章PCV2的cap部分基因原核表达及抗原性的研究

第四章PCV2和PRRSV对仔猪混合感染试验

第五章结论

参考文献

附录

致谢

作者简历

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摘要

本研究从接种疑似PMWS仔猪病料的细胞中分离出一株PCV2,经测序基因组全长为1767bp。序列分析并与国内外毒株进行比对,发现与法国株PCV2(GenBank:AF055394)同源性较高,可达99.4%。并克隆该分离毒株的cap基因片段进行原核表达,获得融合蛋白His-CAP520,试验表明该蛋白具有较好的抗原性,用该蛋白初步建立了检测PCV2抗体的间接ELISA方法。 通过PCV2和PRRSV强毒共感染3周龄健康仔猪来评价其致病性。试验动物随机分为3组,空白对照组(n=3头),PRRSV单独感染组(n=3头),PCV2和PRRSV共感染组(n=6头)。通过临床症状、病理学变化、病原学和血清学检查,对混合感染仔猪的致病性进行了研究。 PCV2和PRRSV混合感染组于攻毒后4天,开始出现呼吸困难、体温升高,在攻毒后14天有1只猪死亡。PRRSV单独组出现呼吸困难、中度嗜睡并在攻毒后28天恢复,空白对照组无异常。PCV2和PRRSV组出现间质性肺炎,淋巴小结周围界限不清,脾脏滤泡发生崩解,细支气管周围有淋巴细胞增生灶,肝细胞胞浆糖原丢失且呈球样,组织病变与断奶后仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)相同。PRRSV单独组出现中等程度的增生性间质性肺炎。混合感染组中PCV2抗体在攻毒后7天时开始上升,攻毒后14天时抗体水平达到最高,后逐渐下降;而PRRSV抗体消长规律与PRRSV单独组相同,在攻毒后14天时开始上升,攻毒后21天时达到顶峰,然后开始下降。两种病毒主要在肺脏、肝脏和脾脏中分布,在肾脏中也少量存在;混合感染组中PRRSV的分布较PRRSV单独感染组更为广泛。经PCR发现血清中病毒在攻毒后4天时检出,到试验结束时仍可检到,病毒血症的维持时间较长。 研究结果表明:PCV2和PRRSV共同感染能引起PMWS的淋巴组织肿大、出血,肉芽肿性炎症,坏死性肝炎,仔猪消瘦、生长缓慢等特征性病变;混合感染能加重PRRSV对仔猪引起的间质性肺炎的严重程度。混合感染可以出现支气管肺炎和明显的肝病变,淋巴结多呈界限明显的块状出血,这是在混合感染组中出现的典型病变。

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