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论文说明:缩略语
独创性声明及关于论文使用授权的声明
第一章前言
1.1课题的提出
1.2青枯病研究进展
1.2.1青枯病菌的研究概况
1.2.2植物抗病机制及病原与植物的互作
1.2.3抗青枯病研究进展
1.2.4问题与探讨
1.3植物抗病基因的克隆方法
1.3.1图位克隆
1.3.2转座子标签法
1.3.3抗病基因类似物法
1.3.4转录水平上几种常用方法的比较
1.4抑制差减杂交
1.4.1抑制差减杂交技术的基本原理
1.4.2抑制差减杂交技术的发展
1.4.3 SSH方法在植物基因分离上的应用
1.4.4小结
1.5本研究的目的和预期目标
1.6总体设计
第二章几种马铃薯抗青枯病鉴定方法的比较
2.1引言
2.2材料与方法
2.2.1供试青枯病菌株及材料
2.2.2青枯病菌的培养
2.2.3青枯病菌接种
2.2.4抗病性评价方法和标准
2.3结果与分析
2.3.1茎枝菌液共培养法与灌根法和毛细管菌液滴注法鉴定马铃薯的比较
2.3.2茎枝菌液共培养法与灌根法及毛细管菌液滴注法鉴定番茄的比较
2.4 讨论
第三章青枯病菌胁迫下的马铃薯早期基因表达
3.1引言
3.2材料与方法
3.2.1试验材料与处理
3.2.2总RNA的提取及mRNA的分离
3.2.3 SSH文库的构建
3.2.4测序及序列分析
3.2.5差减文库筛选
3.2.6 Northern印迹
3.2.7半定量RT-PCR验证
3.3结果与分析
3.3.1试验材料的选择及取材时间的确定
3.3.2总RNA的提取及mRNA的分离
3.3.3 cDNA的合成及合成效率检测
3.3.4接头连接效率及差减杂交效率检测
3.3.5差减产物克隆及文库质量评价
3.3.6测序和差异表达片段的筛选
3.3.7差异表达片段的Northern和RT-PCR验证
3.3.8基因的功能分析
3.3.9抗病相关基因
3.4讨论
3.4.1基于SSH方法所得结果的可靠性
3.4.2 SSH是获得新基因和低丰度表达基因的有效方法
3.4.3信号识别相关EST
3.4.4信号转导和转录因子
3.4.5过敏反应与系统获得性抗性
3.4.6马铃薯与青枯病菌互作中的抗病防御
第四章马铃薯青枯病抗性相关基因cDNA的分离及表达分析
第一节马铃薯青枯病抗性相关基因(全长)cDNA的获得
4.1.1引言
4.1.2材料与方法
4.1.3结果与分析
4.1.4讨论
第二节马铃薯青枯病抗性相关基因的诱导表达
4.2.1引言
4.2.2材料与方法
4.2.3结果与分析
4.2.4讨论
第五章cDNA文库结合RACE方法克隆马铃薯DnaJ-like基因全长cDNA
第一节富集青枯病抗性相关基因SMART-cDNA文库的构建
5.1.1引言
5.1.2材料与方法
5.1.3结果与分析
5.1.4讨论
第二节马铃薯DnaJ-like基因全长cDNA的克隆
5.2.1引言
5.2.2材料与方法
5.2.3结果与分析
5.1.4讨论
第六章结论
参考文献
附录
致谢
作者简历