番茄Ty基因对TYLCV复制、转录和移动的影响及TYLCV侵染后番茄的转录组分析

摘要

番茄黄化曲叶病毒病是一类由双生病毒引起的重要病害，对番茄生产危害极大。源于野生番茄抗性基因的应用显著防止了该病的发生。为深入了解番茄 Ty基因与病毒间的互作，本试验从两个方面进行研究：（1）分别选择含有Ty-2、Ty-1/Ty-3、Ty-1/Ty-3a、Ty-4和Ty-5的番茄材料，以我国主流TYLCV株系TYLCV-IL[CN:SH2]为病毒材料进行苗期接种，使用荧光定量PCR检测技术，研究Ty抗性基因对TYLCV复制、转录和移动的影响；（2）TYLCV侵染28 d后，对Ty-1/Ty-3番茄近等基因系进行转录组分析，研究Ty-1/Ty-3对TYLCV的抗性机制。主要研究结果如下：
　　1. Ty-2具有较好的抑制病毒复制的能力，且不受季节影响；Ty-1/Ty-3有一定抑制病毒复制的能力，但抑制病毒复制的能力弱于Ty-2；Ty-1/Ty-3a和ty-5对TYLCV复制的抑制均受季节影响，春季温度低时，对TYLCV复制有强抑制性，秋季温度高时，抑制力下降；Ty-4春季抑制TYLCV的能力较弱，秋季几乎没有抑制力。
　　2. Ty-2能有效抑制病毒表达，且不受季节影响。春季Ty-1/Ty-3有一定抑制TYLCV表达的能力；秋季抑制病毒转录的能力下降，且抑制病毒V1基因表达的能力下降明显。Ty-1/Ty-3a春季可有效抑制病毒的转录；秋季抑制病毒表达的能力降低，特别是削弱了对V1和C1表达的抑制力，但其抑制力仍明显优于Ty-1/Ty-3。Ty-4抑制病毒表达的能力较弱。ty-5对TYLCV转录的抑制受季节影响，春季可有效的抑制病毒的转录，秋季其抑制作用下降，但仍优于Ty-4和Ty-1/Ty-3。
　　3.通过研究抗性基因对Ty病毒移动的影响发现：Ty-2可有效抑制TYLCV的长距离移动；Ty-1/Ty-3、Ty-1/Ty-3a和ty-5不能彻底抑制TYLCV的移动，但可推迟病毒向植株上部叶片移动的时间，并限制各叶位中病毒的积累量。Ty-4没有抑制病毒移动的能力。
　　4.不同抗性基因材料接种后病症调查发现：接种28天后含 Ty-4的番茄材料表现出典型的TYLCD症状，而携带Ty-2、ty-5、Ty-1/Ty-3a、Ty-1/Ty-3的番茄材料均不表现TYLCD病症。
　　5.通过TYLCV侵染番茄后的转录组测序分析，抗/感番茄材料间有461个基因差异表达。5条差异表达基因涉及光合作用途径。Ty-1/Ty-3的3个基因中，仅Solyc06g051170差异表达，且在抗病材料中该基因的表达量显著高于感病材料，另2个基因在表达上没有显著差异。

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英文缩略表

第一章 引 言

1.1 TYLCD的分布

1.2 TYLCD的影响因素及发病症状

1.3 TYLCD的传毒介体和传毒特性

1.4 TYLCV的研究

1.5 病毒的致病机理

1.6 番茄抗Ty基因简介

1.7番茄与TYLCV的互作

1.8试验设计

第二章 番茄Ty基因对TYLCV复制的影响

2.1试验材料

2.2试验方法

2.3 结果与分析

2.4 讨论

第三章 番茄Ty基因对TYLCV表达的影响

3.1试验材料

3.2试验方法

3.3 结果与分析

3.4 讨论

第四章 番茄Ty基因对TYLCV移动的影响

4.1试验材料

4.2 试验方法

4.3 试验结果与分析

4.4 讨论

第五章 TYLCV侵染番茄的转录组分析

5.1试验材料及试剂

5.2材料处理

5.3 转录组的测序与分析

5.4 试验结果

5.5 讨论

全文结论

参考文献

附录

致谢

作者简历