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第一章 概述
一、乙烯与果实成熟衰老
1.1乙烯与跃变类果实
1.2乙烯与非跃变类果实
二、乙烯研究的发展
2.1乙烯的早期研究
2.2乙烯生理功能
2.3乙烯合成途径的阐明
2.4乙烯信号转导途径研究
三、乙烯生物合成研究
3.1杨循环
3.2蛋氨酸腺苷转移酶
3.3ACC合酶
3.4 ACC氧化酶
四、乙烯信号转导研究
4.1乙烯三重反应
4.2乙烯反应突变体
4.3乙烯的感受
4.4信号的传导
4.5核事件
4.6乙烯信号转导模式
五、CTR的研究
5.1突变的分离
5.2基因的克隆
5.3功能研究
5.4 CTR研究的重要性
六、乙烯与其他激素和信号之间的交谈
6.1乙烯与钙
6.2乙烯与IAA
6.3乙烯与ABA
七、乙烯信号与磷酸化作用
7.1磷酸化作用与植物细胞信号转导
7.2果实成熟过程中的磷酸化作用
7.3乙烯合成、信号转导与磷酸化作用
7.4其他激素与磷酸化作用
7.5 CTR与磷酸化
八、研究目的与内容
第二章 材料与方法
一、材料
1.1材料来源
1.2材料成熟度的划分
1.3实验中所用的引物
二、试剂处理
2.1溶液配制
2.2药剂处理
三、实验方法
3.1番茄果实总RNA的制备
3.2 RNA转膜
3.3 Northern杂交与显影
3.4逆转录PCR
3.5大肠杆菌感受态细胞的制备
3.6大肠杆菌转化
3.7质粒DNA的提取
3.8基因片段回收
3.9番茄叶片总DNA的提取
3.10用于PCR检测的DNA微量制备
3.11酶切及转膜
3.12 Southern杂交(地高辛)
3.13番茄遗传转化(叶盘法)
3.14乙烯的测定
第三章 结果与分析
一、TCTR与成熟、乙烯的关系
1.1 TCTR1基因与成熟的关系
1.2 TCTR2基因与成熟的关系
1.3 TCTR1基因与乙烯的关系
1.4 TCTR2基因与乙烯的关系
二、ABA、IAA、钙对TCTR1基因表达的影响
2.1 ABA、钙对TCTR1基因表达的影响
2.2 IAA、钙对TCTR1基因表达的影响
三、磷酸化、去磷酸化对TCTR1基因表达的调控
3.1激酶抑制剂K252对番茄果实中TCTR1基因表达的影响
3.2磷酸酶抑制剂OA对番茄果实中TCTR1基因表达的影响
四、转基因分析
4.1反义TCTR3表达载体的构建
4.2番茄植株的遗传转化
4.3转基因植株鉴定
4.4转反义TCTR3番茄植株的乙烯生成情况
第四章 讨论
一、TCTR基因与乙烯、成熟的相关性
1.1 TCTR1、TCTR2在果实成熟过程中的表达模式
1.2 TCTR1、TCTR2的乙烯调控模式
1.3番茄果实中与乙烯、成熟相关的基因
1.4乙烯生物合成、信号转导的乙烯调控
二、乙烯、IAA、ABA调控乙烯合成、TCTR1基因表达的模式
2.1激素对乙烯生成的调控模式
2.2激素对TCTR基因的调控模式
三、钙与乙烯合成、信号转导的关系
3.1钙对乙烯生物合成的影响
3.2钙对信号转导组分基因表达的调控
3.3钙信使对乙烯作用图
四、激酶磷酸化的作用
4.1磷酸化/去磷酸化对基因表达的影响
4.2磷酸化/去磷酸化与激素在调节TCTR1基因表达中的关系
4.3激酶和磷酸酶以及抑制剂对乙烯信号转导可能的调控模式
第五章 结论与后续工作
第六章 参考文献
第七章 致谢
