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ALMT1及其水稻(Oryza sativa)和拟南芥(Arabidopsis thaliana)同源蛋白功能和细胞定位研究

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第一章文献综述及研究思路

第二章试验材料与方法概要

第三章ALMT1在大肠杆菌XL1Blue中的表达效应

第四章ALMT1在大肠杆菌Rosetta(DE3)中的表达效应

第五章ALMT1同源基因在大肠杆菌Rosetta(DE3)中的表达效应

第六章ALMT1同源蛋白的细胞定位

第七章讨论

参考文献

致谢

作者简历

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摘要

在酸性土壤中,铝毒是一个限制作物产量的重要因素。微摩尔浓度的三价铝离子(Al3+)就能抑制根系生长。据估计,在世界范围内酸性土壤约占可耕地面积的30-40%。植物分泌有机酸通过螯合铝离子在解铝毒方面起着相当重要的作用。ALMT1(Al-activatedMalateTransporter1)是一个控制小麦抗铝性的主要基因。它是第一个从植物中克隆出来的有机酸转运蛋白基因。我们在大肠杆菌中表达ALMT1,并且检测不同处理的培养液中苹果酸浓度。发现ALMT1大肠杆菌转化子细胞培养16h后,培养液LB中的苹果酸浓度增加。相反,空载体对照LB培养液中的苹果酸浓度降低至零。ALMT1大肠杆菌转化子细胞表现出铝专一性诱导的苹果酸分泌,且表现出对铝的剂量效应:随着铝浓度的增加苹果酸分泌量增加。ALMT1拟南芥同源基因At1g08430的大肠杆菌转化子细胞培养16h后,培养液中的苹果酸浓度和ALMT1转化子细胞的相似。在大肠杆菌中,ALMT1水稻同源蛋Rice3的苹果酸运输活性比本研究中的其它三个水稻同源蛋白Rice1,Rice6和Rice10都高,但是远低于ALMT1在大肠杆菌中的活性。除了Rice7和At5g46600明显定位在细胞膜上,本研究中的其它ALMT1同源基因并没有表现出明显的膜定位。

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