猪IgGⅡ类Fc受体（FcγRⅡ）基因克隆与表达

摘要

Fc受体(FcR)为特异亲和免疫球蛋白(Ig)Fc片段的细胞表面分子，广泛表达于免疫辅助细胞和效应细胞，具有许多重要的生理功能，是体液免疫与细胞免疫的联系纽带，在机体免疫调节中起关键作用。目前仅人和小鼠的三类IgGFc受体(FcγRⅠ、FcγRⅡ和FcγⅢ)研究的较为深入。 本研究利用生物信息学和分子生物学技术，首次克隆了猪IgGⅡ类Fc受体cDNA，并通过玫瑰花环形成实验(EA)进一步鉴定了配体亲和特性。即用人CD32氨基酸序列检索NCBI的EST数据库(包括除人和老鼠以外的所有物种核苷酸序列)(tBLASTn)，发现了一个高同源序列。再采用cDNA快速扩增技术(RapidamplificationofcDNAends，RACE)从猪外周血白细胞cDNA中分别扩增到了3’端、5’端以及全长cDNA序列，获得了猪IgGⅡ类Fc受体(FcγRⅡ)基因，命名为swFcγRⅡ。swFcγRⅡ全长1488bp，编码297个氨基酸的跨膜糖蛋白，包括两个Ig样结构域，胞内区含有基于酪氨酸的受体抑制基序(immunoreceptortyrosine-basedinhibitorymotif，ITIM)。swFcγRⅡ氨基酸序列分别与人和老鼠的同源性为67％和52％。随后，RT-PCR检测到了swFcγRⅡmRNA在外周血白细胞、肝脏、肺脏和肠系膜淋巴结有较高表达。 将swFcγRⅡORF基因亚克隆到真核表达载体pcDNA构建成重组质粒pcDNA/swFcγRⅡ，再用脂质体法转染COS-7细胞，用玫瑰花环实验鉴定了swFcγRⅡ配体亲和特性。swFcγRⅡ的克隆对于进一步了解猪IgG与受体间的相互作用以及开发新型免疫制剂有重要意义。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词表

独创性声明及关于论文使用授权的说明

第一章IgG Fc受体研究进展

第二章swFcγRⅡ cDNA克隆

第三章swFcγRⅡ在COS-7细胞表面的表达

第四章swFcγRⅡ基因在组织中的表达分布

第五章研究总结

参考文献

致谢

作者简历

在读期间投稿和已发表的论文